华韵的HuayunGel™ Elite PAGE预制胶(Bis-Tris) (HuayunGel™ Elite Precast PAGE Gel for Bis-Tris System)是华韵新一代Elite系列镀膜塑料板预制胶,是一种使用安全、便捷、高品质的常规尺寸聚丙烯酰胺预制凝胶,采用MOPS或MES电泳缓冲系统,仅需40-60分钟即可完成电泳并获得非常平整锐利的条带。本预制胶有约1.5厘米高的浓缩胶,具有非常优良的分离效果,电泳后蛋白条带平整、清晰、细腻、锐利,几乎没有边缘效应;同时本预制胶胶板为镀膜塑料材质,减少了对蛋白的非特异性吸附,电泳效果更好,达到甚至超过了自配PAGE胶的电泳效果,常用于PAGE和Western检测。
华韵的HuayunGel™ Elite PAGE预制胶(Bis-Tris, 简称BT)提供不同浓度的梯度胶和固定浓度胶,并有10孔和15孔两种孔数选择。梯度胶的浓度包括4-15%、4-20%、8-16%和8-20%;固定浓度胶包括8%、10%、12%和15%。梯度胶中以4-20%的最为常用。如果有较大量的特殊浓度需求,华韵可提供定制服务。每种预制胶的最佳分离范围请参考下表:
产品编号 |
预制胶浓度 |
孔数 |
最大上样量 |
电泳缓冲液体系 |
转膜缓冲液体系 |
最佳分离范围 |
P0842/P0843 |
8% |
10/15 |
50/30μl |
MOPS/MES |
Bis-Tris |
30-90kDa |
P0846/P0847 |
10% |
10/15 |
50/30μl |
MOPS/MES |
Bis-Tris |
20-80kDa |
P0849/P0850 |
12% |
10/15 |
50/30μl |
MOPS/MES |
Bis-Tris |
12-60kDa |
P0852/P0853 |
15% |
10/15 |
50/30μl |
MOPS/MES |
Bis-Tris |
10-40kDa |
P0856/P0857 |
4-15% |
10/15 |
50/30μl |
MOPS/MES |
Bis-Tris |
20-180kDa |
P0859/P0860 |
4-20% |
10/15 |
50/30μl |
MOPS/MES |
Bis-Tris |
10-180kDa |
P0863/P0864 |
8-16% |
10/15 |
50/30μl |
MOPS/MES |
Bis-Tris |
20-90kDa |
P0866/P0867 |
8-20% |
10/15 |
50/30μl |
MOPS/MES |
Bis-Tris |
10-90kDa |
本预制胶含有约1.5厘米高的4%浓缩胶,可以有效确保获得非常锐利的条带。
本预制胶丙烯酰胺(Acrylamide)与甲叉丙烯酰胺(Bisacrylamide)的比例为29:1,凝胶厚度为1.0mm。加样孔数为10孔的最大上样量为50μl,加样孔数为15孔的最大上样量为30μl。胶板尺寸:宽×高×厚度为100×90×4.8mm;凝胶尺寸:宽×高×厚度为84×74×1mm。
聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)技术广泛用于蛋白质的分离纯化、检测、鉴定、分子量分析等实验,是生命科学研究中最基本的实验技术之一。常见的Western印迹(Western blot)检测就是基于PAGE的[1]。
华韵的HuayunGel™ Elite PAGE预制胶(Bis-Tris)使用近中性pH的Bis-Tris缓冲液制备,不含SDS,建议用于变性蛋白电泳,不建议用于非变性蛋白电泳。
本预制胶使用常用的MOPS/MES缓冲系统的SDS-PAGE电泳液,推荐使用华韵专门为本预制胶研制的配套电泳液,或参考使用说明自行配制相应的电泳液。对于变性蛋白电泳,推荐使用HuayunGel™ MOPS SDS Running Buffer (P0741/P0743)或HuayunGel™ MES SDS Running Buffer (P0745/P0747)。MOPS缓冲系统是大分子量和中等分子量蛋白电泳的理想缓冲液,适用于分子量在14-200kDa范围内的蛋白的电泳;MES缓冲系统是低至中分子量蛋白质电泳的理想缓冲液,适用于分子量在2-200kDa范围内蛋白质的电泳。
本预制胶电泳后可以使用Bis-Tris缓冲系统的转膜液进行转膜,推荐使用HuayunGel™ Transfer Buffer (for Bis-Tris Gels) (P0753/P0755)。
关于10孔和15孔预制胶的选择。需要检测的样品数量多或者定量时,推荐使用15孔预制胶,通量更大、更便于进行较多样品的定量统计分析;需要获得非常漂亮的代表性图片时,推荐使用10孔预制胶,10孔预制胶获得的条带更加平整和锐利。
本产品使用安全、便捷。本预制胶无需配制,即开即用,去掉梳子即可上样,而传统的PAGE配制凝胶繁琐费时,并且制胶时还会接触有毒和刺激性试剂。
本产品质量稳定。本预制胶采用镀膜塑料胶板,避免了玻璃胶板在运输和使用过程中的破裂,更安全,并大大减少了胶板对蛋白的吸附,电泳效果更好。本产品流水线灌注,品质稳定可靠,重复性好,不同批次的产品一致性高。
本产品电泳效果好。本预制胶的蛋白质分离效果极佳,蛋白条带平整、清晰、细腻、锐利,转膜效率高。
本产品电泳槽兼容性好。本预制胶兼容市场上主流的小型电泳槽,如华韵的MiniProGel™蛋白制胶与电泳系统(E6001/E6005)、Bio-Rad公司的Mini-PROTEAN® Tetra Cell电泳槽、Life公司的XCell SureLock® Mini-Cell电泳槽(需与华韵可免费提供的特制挡板配合使用)、以及上海天能、北京六一等的mini胶电泳槽或其它胶板宽度在10厘米的电泳槽。
本产品电泳时间短。本预制胶推荐的电泳电压和电泳时间为150V 40-60分钟,即可完成电泳并获得非常平整和锐利的电泳条带。具体的电泳时间可以根据溴酚蓝的电泳位置或实验的具体需求进行确定。
华韵多种HuayunGel™ PAGE预制胶的比较和选择可以参考华韵的相关网页:http://www.huayunbio.cn/support/precast-page-gel.htm。
华韵HuayunGel™ Elite PAGE预制胶(Bis-Tris)保存稳定性好,保质期长。本预制胶4ºC条件下保存可长达12个月。参见图1,本产品在37ºC保存6天,电泳效果和在4ºC保存没有明显的变化。
图1.华韵HuayunGel™ Elite PAGE预制胶(Bis-Tris)在4ºC保存或37ºC保存6天的电泳效果图。华韵的彩色预染蛋白质分子量标准(P0079、P0076、P0072、P0068、P0771、P0776、P0779、P0773)使用4-20%或10% HuayunGel™ Elite PAGE预制胶(Bis-Tris)在150V电压下电泳40分钟。实际效果会因实验条件的不同而存在差异,本图仅供参考。