华韵研发生产的HuayunCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit，即HuayunCUBIC™动物组织透明化试剂盒，是一种非常有效地对动物整个身体、整个器官、组织块或类器官等非常简单、便捷、快速地进行高质量、高透明度透明化处理的试剂盒。经本试剂盒透明化处理的动物样品，可以与后续的免疫荧光、免疫组化、常规或荧光染色、生物发光等结合起来，可以实现组织块、类器官、器官甚至整个动物体的三维成像，从而广泛用于生物、医学领域的研究。

CUBIC (Clear, unobstructed brain/body imaging cocktails and computational analysis)是一种简单、有效的动物组织透明化处理方法[1]。华韵的HuayunCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit和常规的CUBIC透明化效果基本一致。

本试剂盒提供的HuayunCUBIC™-I Solution不仅可以促使组织、器官脱脂，还可以使组织、器官中的血红素脱色。HuayunCUBIC™-II Solution可以调节组织的折射率，使其与溶剂折射率相匹配，尽量减少了组织中的散射光，利于光学成像。本产品进行动物组织透明化的实验流程参考图1。

图1. 华韵的HuayunCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit (HuayunCUBIC™动物组织透明化试剂盒)对动物组织、器官等进行透明化处理的实验流程图。

本试剂盒实验操作简单便捷。使用本产品提供的试剂简单浸泡动物组织、器官等样品，就可以轻松实现组织器官等样品的透明化，无需使用任何特殊的仪器或设备。

本试剂盒处理的组织器官等样品透明度高。传统的组织透明化方法侧重于均匀化单个组织的不匹配折射率，导致不透明度降低。本试剂盒所使用的透明化试剂HuayunCUBIC™-I Solution具有很强的脱色和脱脂能力，再结合HuayunCUBIC™-II Solution有效调节组织器官等的折光率，使其与溶液的折光率相匹配，以增加组织透光率，能有效实现组织器官等的高透明度。本产品处理的组织器官等，实测透明度通常都优于SCALEVIEW-S、SeeDB2或SeeDB等方法[2]。本产品和Fujifilm/Wako的CUBIC Trial Kit，TCI公司的Tissue Clearing Reagent CUBIC-L [for Animals]与Tissue-Clearing Reagent CUBIC-R+(M) [for Animals]的透明化效果基本一致。本产品和Thermo的CytoVista™ Tissue Clearing Kit与CytoVista™ Tissue Clearing/Staining Kit，Abcam的Tissue Clearing Kit的使用效果相近。

本试剂盒透明化时间短。传统的SCALEVIEW-S或SeeDB2方法组织器官的透明化时间相对都比较长[2]。本试剂盒通常在1-3周就可以轻松实现小鼠组织器官等的透明化。6周龄C57BL/6小鼠不同组织器官透明化实测所需要时间参考下表。实际检测效果会因具体的实验条件不同而存在差异，下表仅供参考。

本试剂盒适用性广。本试剂盒广泛适用于动物组织器官甚至整体的透明化。本试剂盒用于6周龄C57BL/6小鼠不同组织器官透明化的实测效果请参考图2。

图2. 华韵生产的HuayunCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit用于小鼠组织器官的透明化效果图。本图为6周龄C57BL/6小鼠整脑、肾、脾、腿部肌肉、心脏、小肠截段、胃、肺、白色脂肪、肝、大肠截段、胰腺透明化前后的实拍效果图。图片中每小格的长宽均为1mm，各组织或器官的处理前参数、关键试剂的使用量及时间参考见表1。实际结果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中效果仅供参考。

表1. 华韵生产的HuayunCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit对6周龄C57BL/6小鼠组织器官透明化处理前参数、关键试剂的使用量及处理时间参考表。

本试剂盒兼容荧光蛋白和后续的荧光染色。本试剂盒在使用过程中可以充分保护荧光蛋白的稳定性，不会导致EGFP、EYFP、mCherry等荧光蛋白的变性而失去荧光。用于6周龄C57BL/6小鼠组织器官透明化处理后的DAPI染色效果请参考图3。

图3. 华韵HuayunCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit用于6周龄小鼠脑和小肠透明化处理后的DAPI染色效果图。图A为6周龄C57BL/6小鼠整脑DAPI染色4倍镜下实拍效果图。图a和b分别为前脑和中脑40倍镜下局部实拍效果图。图B为6周龄C57BL/6小鼠小肠截段DAPI染色4倍镜下实拍效果图。图c和d分别为小肠绒毛和表面40倍镜下实拍效果图。比例尺均为100µm。实际结果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图片效果仅供参考。