华韵/植物原生质体转染试剂盒
| 产品编号 | HY-B7948 |
| 产品分类 | 常用生化试剂 |
| 品牌 | 华韵生物 |
| 规格 | 100次 |
| 品牌 | 货号 | 纯度 | 规格 | 目录价(CNY) | 会员价(CNY) | 数量 | 购物车 |
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| 华韵生物 | HY-B7948-1 | 100次 | ¥1187.00 |
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| 详情 | 华韵生产的植物原生质体转染试剂盒(Plant Protoplasts Transfection Kit)，可用于将质粒、Cas9/sgRNA等蛋白和RNA转染进入植物原生质体内，经转染的植物原生质体经过一定时间培养后，可用于检测外源基因的表达和功能，或者转染后的基因下调、基因敲除或基因编辑效果等。 对于拟南芥原生质体，使用本试剂盒转染质粒后通常2-6小时可以检测相关基因的转录变化(mRNA等RNA的变化)，通常2-16小时后可以检测到相关蛋白表达的变化，通常24小时可以检测到基因编辑的效果。 植物原生质体是开展一系列植物细胞研究的重要材料，可以用于如将DNA、RNA或者蛋白通过电击法(electroporation)、显微注射(microinjection)或聚乙二醇法介导的转染(PEG-mediated transfection)等。本试剂盒采用的是一种优化的聚乙二醇转染方法，借助聚乙二醇短时间内对原生质体产生的冲击效应，使质粒DNA、RNA或蛋白得以进入原生质体，具有使用便捷、转染效率高等优点。 本试剂盒可与华韵生产的植物原生质体分离试剂盒(C0362)配合使用，完成一些模式生物如拟南芥原生质体外源基因的短时间或长期表达或者内源基因的关闭、下调或编辑等。 使用本试剂盒将植物EGFP表达质粒转染拟南芥原生质体的效果如图1所示。图中可见可以获得非常高的转染效率。 
图1. 使用华韵植物原生质体转染试剂盒(Plant Protoplasts Transfection Kit)转染拟南芥原生质体的效果图。对于使用华韵的植物原生质体分离试剂盒(C0362)获得的拟南芥叶片原生质体，参考如下体系制备转染试剂溶液：称取0.48g转染试剂于2ml离心管(FCT121)中，加入300μl溶液A、480μl溶液B，颠倒混匀，使转染试剂充分溶解后备用(足够用于10个后续的10个样品的转染)。在2ml的圆底离心管(FTUB019)中加入20μg p35SPPDK-EGFP-Flag (植物用绿色荧光蛋白) (D2627)，加入100μl制备好的原生质体，轻柔混匀后加入110μl当日配制好的转染试剂溶液，轻柔混匀，室温静置5min后加入440μl终止液，轻轻颠倒混匀，室温100g离心1min，去除上清，再加入0.5ml终止液，轻柔重悬原生质体，室温100g离心1min后，尽量去除上清，收集原生质体。加入1ml培养液，小心重悬原生质体后将其平置25℃培养过夜(约16h)，次日于荧光显微镜下检测EGFP荧光信号。上图为实际检测的明场和荧光照片。 一个小包装(C0563S)的本试剂盒可以用于相当于6孔板100个孔的样品，12孔板200个孔的样品，或24孔板400个孔的样品的转染。一个中包装(C0563M)的本试剂盒可以用于相当于6孔板500个孔的样品，12孔板1000个孔的样品，或24孔板2000个孔的样品的转染。 |
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| 象形图 | |
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