Lipo8000™转染试剂(Lipo8000™ Transfection Reagent)是华韵最新研发的一种以纳米材料为基础的最便捷的高效细胞转染试剂,达到甚至超过了国际主流转染试剂的转染效果,并且转染过程无须任何孵育时间,实现了细胞转染的至简操作。适用于把质粒、siRNA或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸、以及核酸蛋白复合物或带负电荷的蛋白转染到真核细胞中,也可以用于活体动物的核酸转染以及用于基因治疗。
Lipo8000™转染试剂的纳米技术可保证其瞬时转染和稳定转染时的可靠性和稳定性。
Lipo8000™转染试剂使用特别便捷,无血清培养液和核酸及转染试剂可以直接混匀,质粒转染无需任何孵育时间,即可直接加入到细胞培养器皿内,实现了细胞转染的至简操作。
Lipo8000™转染试剂对于常见的哺乳动物细胞具有非常高的转染效率、重复性好、操作简单、通常观察不到细胞毒性,对于贴壁细胞和悬浮细胞都适用,特别适用于难转染的贴壁细胞。Lipo8000™转染试剂由于几乎完全没有细胞毒性,从而在转染后无需进行细胞培养液的更换,在转染24-48小时后直接收集细胞进行蛋白表达鉴定即可。
Lipo8000™转染试剂经过对小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3、人胚胎肾细胞HEK293/HEK293T、宫颈癌细胞Hela、结肠癌细胞HCT116、肝细胞HepG2和肺癌细胞A549等多种细胞的测试,转染效率和Thermo公司的Lipofectamine® 3000 Transfection Reagent、Promega公司的ViaFect™ Transfection Reagent相当,在一些细胞中甚至比Lipofectamine® 3000和ViaFect™的转染效率更高。贴壁细胞转染试剂的比较和选择请参考:http://www.huayunbio.cn/support/lipo.htm。
Lipo8000™转染试剂不仅适用于质粒、siRNA等单一成分的细胞转染,也适合多个质粒或者质粒与siRNA等的组合转染。
Lipo8000™转染试剂转染过表达质粒后,通常24-48小时后达到较高的蛋白表达水平,并且很多情况下蛋白表达量在转染后48小时显著高于转染后24小时;转染siRNA通常3-5天后对于目的基因的下调水平会比较理想。
Lipo8000™转染试剂转染细胞时,不受培养液中的血清和抗生素的影响,即可以在血清和抗生素存在的情况下进行细胞转染。
Lipo8000™转染试剂的转染效果可以通过转染表达EGFP等荧光蛋白的质粒进行快速鉴定。
Lipo8000™转染试剂与Lipofectamine® 3000 Reagent转染效果比较请参考图1-8。
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图1. 华韵生产的Lipo8000™转染试剂与Thermo公司的Lipofectamine® 3000转染试剂和Promega公司的ViaFect™转染试剂用EGFP表达质粒转染图中所示细胞时的转染效率比较。仅转染试剂不同,其余条件一致。图中数据仅供参考,实测效果可能会因为所使用细胞的实际株系、代数、培养条件等的不同而有所不同。
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图2. Lipo8000™转染试剂(A, B)、Lipofectamine® 3000转染试剂(C, D)和ViaFect™转染试剂(E, F)用EGFP表达质粒转染NIH3T3细胞后的实拍明场和荧光照片。
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图3. Lipo8000™转染试剂(A, B)、Lipofectamine® 3000转染试剂(C, D)和ViaFect™转染试剂(E, F)用EGFP表达质粒转染HEK293T细胞后的实拍明场和荧光照片。
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图4. Lipo8000™转染试剂(A, B)、Lipofectamine® 3000转染试剂(C, D)和ViaFect™转染试剂(E, F)用EGFP表达质粒转染HEK293细胞后的实拍明场和荧光照片。
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图5. Lipo8000™转染试剂(A, B)、Lipofectamine® 3000转染试剂(C, D)和ViaFect™转染试剂(E, F)用EGFP表达质粒转染Hela细胞后的实拍明场和荧光照片。
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图6. Lipo8000™转染试剂(A, B)、Lipofectamine® 3000转染试剂(C, D)和ViaFect™转染试剂(E, F)用EGFP表达质粒转染HCT116细胞后的实拍明场和荧光照片。
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图7. Lipo8000™转染试剂(A, B)、Lipofectamine® 3000转染试剂(C, D)和ViaFect™转染试剂(E, F)用EGFP表达质粒转染HepG2细胞后的实拍明场和荧光照片。
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图8. Lipo8000™转染试剂(A, B)、Lipofectamine® 3000转染试剂(C, D)和ViaFect™转染试剂(E, F)用EGFP表达质粒转染A549细胞后的实拍明场和荧光照片。
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每毫升本转染试剂大约可以转染10厘米培养皿40个、6厘米培养皿125个、6孔板250个孔、12孔板625个孔、24孔板1250个孔、48孔板2500个孔、96孔板6250个孔。