一、原理
细胞划痕(wound healing)测定细胞迁移和修复能力的方法之一，类似于体外伤口愈合模型。
培养皿或孔板中培养细胞至完全长满后用微量枪头在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分的细胞，然后继续培养细胞至实验设定的时间，取出细胞培养板，观察周边细胞的生长迁移能力，通过不同分组之间的细胞对于划痕区修复能力的不同来判断各组细胞的迁移与修复能力。
二、直接法：
HUVEC细胞为例
1、从培养箱中取出处理结束的细胞（长满）。
2、用枪头划线（200微升的黄色枪头），轻轻在孔板中划十字线（可事先借助尺子在孔板背面用马克笔画十字），用PBS清洗一遍，更换新培养基（除去划痕时产生的细胞碎片）。
3、加入丝裂霉素C（1 ug/mL）处理1h后，用PBS清洗一遍，更换为无血清培养基，细胞状态差的加2%FBS培养基。
4、记为0 h，显微镜下100x拍照，培养箱中继续培养24 h。
5、24 h后换液拍照，观察伤口愈合的情况。
6、迁移效果不佳的话可适当延长培养时间。
三、注意事项：
1、划线时尽量保持垂直、轻柔，太用力会产生锯齿状断面。
2、如果无血清培养后细胞状态不好可更换为含2%FBS的培养基。
3、拍照时尽量保证视野与划痕垂直，计算时比较方便。
四、间接法（插件法）
1、先将插件从酒精中取出，放置在干净的24孔板盖上（内表面），开紫外和风机灭菌吹干，差不多30 min-1h。
2、吹干后将插件放置在24孔板中，垂直放置。（粘性一面粘住孔板）
3、 将各组细胞胰酶消化，完全培养基重悬成细胞悬液，细胞计数，调整悬液浓度为1*10^6 cells/ml。
4、插件的每孔中加入100 μL的细胞悬液。
5、效果不佳的话可适当延长培养时间。
