番红-固绿染色一般用于关节软骨及软骨下骨的形态学研究
一、作用原理:嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成蓝色,与呈现红色的软骨对比鲜明,从而将软骨组织和骨组织区分开。
二、实验流程:
脱蜡至水-固绿染色-番红染色-封片镜检
三、实验步骤:
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯I20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇I10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。
2、番红染色:切片入1%番红染液染色1-2h。自来水稍洗,洗去多余染料。
3、脱色:入50%,70%,80%梯度酒精脱色各1min。
4、固绿染色:切片入0.5%固绿染液中染色30-60s。无水乙醇中脱色30s,无水乙醇I中脱色1min。
5、封片:切片于60℃烤箱烤干后于二甲苯透明5min,中性树胶封片。
6、显微镜镜检,图像采集分析。
大鼠骨组织
四、结果判读:
软骨呈红色,成骨呈绿色。