细胞粘附分子(cell sdhesion molecules,CAMs)是一类膜表面糖蛋白,它们以配体-受体特异性结合的方式介导细胞与细胞间、细胞与细胞外基质间的相互接触和结合并调节细胞的功能,在胚胎发育和分化、正常组织结构的维持、炎症反应、免疫应答、凝血和血栓形成、创伤修复、肿瘤浸润与转移等许多生理和病理过程中发挥重要的生物学作用。
一、实验流程:
细胞培养-Fn预铺板-细胞接种-吉姆萨染色-观察拍照
二、实验步骤:
1、包被:用10 μg/mL的FN纤连蛋白预铺96孔板,100 μL/孔,4℃过夜,PBS洗涤3遍;
2、封闭:用1%BSA于37℃封闭1 h,PBS洗涤3遍;
3、接种:取对数期细胞,按5×103/孔接种,每孔100 μL的完全培养基,每组设3个复孔,37℃孵育1 h后,PBS洗去未粘附的细胞;
4、固定:4%的多聚甲醛室温固定30 min,PBS洗涤3遍;
5、染色:加入100 μL的姬姆萨染料染色15 min,PBS洗涤3遍;
6、显微镜拍照
三、注意事项:
FN与1%BSA需现用先配