每组每个时间点要有三个重复,本次以每组一张图片为例,其余做法一致。
1、将组1-0h图片拖入ImageJ中,选择画笔工具,设置参数(宽度为10,颜色黑色),沿着细胞边缘画一条直线(按住shift再点击鼠标拉动划线会得到一条直线)。
2、选择直线工具,在两条边缘直线中间画线,按住Ctrl+M得到线段长度(即划痕宽度)。
3、组2-0h、组1-24h、组2-24h同样处理方法。
4、将时间、组别、测得长度数据输入表中。求迁移率,公式如下:
细胞迁移率 =(0 h 划痕宽度-24 h划痕宽度)/ 0 h 划痕宽度×100%
5、求平均值、标准差、显著性。
6、在GraphPad Prism软件中输入对应数据。得最终柱状图,纵坐标为伤口愈合区百分比,横坐标为组别。