以HTR8细胞为例,测0、24、48、72h细胞增殖能力。
1)取对数生长期的HTR8细胞,消化重悬,调整细胞浓度为4*10^4/mL,每孔100 μL接种于96孔板中,每组6个复孔;
2)放于培养箱中培养24h后,加入10%的cck8,继续培养1h,于450nm处测OD值记为0h;
3)其余板更换为各组含药培养基100 μL/孔,继续共培养24、48、72h后,分别加入10%的cck8,继续培养1h,于450nm处测OD值。
注意事项:
1、需设置调零组(只含100ul培养基不含细胞)和正常细胞对照组;
2、含药培养基处理组在加CCK8试剂前最好更换为正常培养基,避免药物与CCK8试剂产生反应影响结果;
3、若加完CCK8 1h后仍无明显颜色变化,建议加长时间,可增加30min-1h后再测,总时长最好不要超过2h。
细胞增殖率 = (实验组吸收值 - 调零吸收值) / (对照组吸收值 - 调零组吸收值) × 100%
实验组为添加了药物等处理的细胞,对照组为未处理的细胞,调零组为不含细胞的培养基。