一、横向切片
1.原因：横向切片质量与石蜡切片时的温度密切相关。石蜡在较高温度下可能会显得软弱，容易产生皱褶。可以尝试对比在常温和冷冻状态下切片糯米滋，体验两者之间的不同。
2.解决方案:建议在切片前进行预冷处理，将样本置于-20°C环境中半小时，可改善切片质量。
3.其他:横向皱纹并不会严重影响结果，若展片后形态良好，则这类切片仍可使用。展片后在显微镜下观察样本形态，结果将更加清晰。
二、纵向裂痕
1.原因:
①刀片局部磨损、缺口或有蜡粒粘在刀片局部。
②切片时蜡块温度过低。
2.解决方案:
①通过移动刀片，观察后续裂痕的出现位置，以判断是否是刀片局部存在问题。若是，应避开该区域或更换刀片。
②提高预冷温度，例如将-20°C调整为4°C，或者不进行预冷处理。要及时调整蜡块的温度以确保切片质量。
三、样本破裂
1.原因:
①最常见的原因是在脱水和透明化步骤中的不到位或过度处理。
②有时破裂问题与样本的特性有关，尤其是涉及到一些人造材料时。
2.解决方案:
关于脱水
①要确保脱水的最后一步中乙醇不含水分，并且处理时间适当。
②若在第一次透明化（使用二甲苯）后发现样本中出现了白色云絮状物质，应检查样本是否透明到足以看到另一侧包埋盒的空隙。如果最后一步无水乙醇处理不到位，请再次进行无水乙醇处理。
③如果样本需要在乙醇中过夜，请存放在冰箱中，否则可能导致过度脱水。
3.二甲苯后的观察(2mm厚皮肤)
① 理想状态：显微镜下显示透明度良好，能够清晰地透过组织看到背后的条纹状孔道结构。
② 凑合使用：样本中心存在微小不透光区域，但整体外围透光效果较好。
③ 脱水过程失败：此时需要重新进行亚硝乙醇去水处理，样本呈现白色云状絮块，整体不透光现象明显。重新进行去水处理以确保样本状态的清晰度和透明度。
4.关于样本特性
①建议在制备样本时增加预冷环节，例如将温度从-20℃调整为4℃，或者可以考虑不进行预冷处理。
②切片时要注意样本的方向，最好让刀片的运动方向与样本内部组织和纤维的走向保持一致，避免刀片切断或穿过组织中的纤维。
③在浸水处理中，可以考虑将样本浸泡在冰水中过夜，尤其对于大样本效果更佳。
有些时候,可以通过边切片边向蜡块“哈气”解决,这可能是第①点(升温)和第③点(湿润蜡块)的综合作用。
四、切不成带
1.原因:
①切片时蜡块温度过低
②和石蜡本身特性有关
2.解决方案:
①提高预冷温度，例如将预冷温度从-20℃提高到4℃，或者干脆取消预冷步骤。
②如下图修整蜡块在切片前修整蜡块，使刀片能够正确接触到断口，这有助于提高切片相连处的粘连性。
五 、注意事项
① 在处理蜡块时务必确保采用一致的处理方式，以确保切片的厚度基本一致。任何不一致可能会影响后续染色深度。
② 切片时，应该以较慢和均匀的速度摇转柄。尽管有时快速猛转可能有作用，但不应将其作为常规操作手法。
③ 石蜡具有不同的熔点和温度范围，因此其特性也各不相同。在特定温度下，一种蜡块可能合适，而另一种则可能不适用。因此，操作人员需要根据实际情况选择合适的温度。
