温度、pH和激活剂对酶促反应的影响

影响酶促反应速率的主要因素包括：酶浓度、底物浓度、反应温度、反应介质的pH和离子强度以及有无抑制剂或激活剂的存在等。

（1）酶浓度对酶促反应速率的影响：在一定的pH和温度下，当底物浓度大大超过酶浓度时，反应速率与酶的浓度呈正比关系。

（2）温度对酶促反应速率的影响

在温度较低时，温度对碰撞机会影响较大，反应速率随温度升高而加快，但温度超过一定数值后，酶受热变性的因素占优，反应速率反而随温度上升而下降，形成倒V形曲线。在此曲线顶点所代表的温度下，酶活性最高,这时的温度被称为酶的最适温度。

最适温度：在较低的温度范围内，酶反应速率随温度升高而增大，但超过一定温度后,反应速率反而下降，因此只有在某一温度下，反应速率达到最大值，这个温度通常就称为酶反应的最适温度。（名词解释考点）

一般讲，动物细胞内的酶最适温度在35~40℃，植物细胞中的酶最适温度稍高，通常在40~50 ℃之间，微生物中的酶最适温度差别较大，如Taq DNA 聚合酶的最适温度可高达70 ℃。

酶的最适温度不是酶的特征性常数，原因是它与反应时间有关，不是一个固定的值。酶可以在短时间内耐受较高的温度；相反，延长反应时间，最适温度便降低。常受到其他条件如底物种类、作用时间、pH和离子强度等因素影响而改变。（判断题考点）（酶以固体形式保存较好）

（3）pH对酶促反应的影响

pH不仅对酶的稳定性有影响，还对其活性有影响。只有在特定的pH下，酶、底物和辅酶或辅基的解离情况最适于它们相互结合，并发生催化作用，使酶活性最高，这时的pH被称为酶的最适pH。（最适pH和酶的最稳定pH不一定相同，和体内环境的 pH也未必相同）

最适pH：酶的活力受环境pH的影响，在一定pH下,酶表现最大活力，高于或低于此pH，酶活力降低，通常把表现出酶最大活力的pH称为该酶的最适pH。（名词解释考点）

最适pH是酶的特性之一，但酶的最适pH不是一个常数，受许多因素影响，随底物种类和浓度，缓冲液种类和浓度的不同而改变（判断题考点），因此最适pH只有在一定条件下才有意义（应选取适宜的缓冲液，保证酶的活力）。

大多数酶的最适 pH在5~8之间，动物体的酶多在pH 6.5~8.0之间，植物及微生物中的酶多在 pH 4.5~6.5。但也有例外，如胃蛋白酶的最适pH为1.5，肝中精氨酸酶最适pH为9.7。（应当指出酶在体外所测定的最适pH与它在生物体细胞内的生理pH并不一定相同。因为细胞内存在多种多样的酶）

pH的影响原因：

①引起酶的空间构象发生改变。

②酶反应介质的pH可影响酶分子，特别是酶活性中心上必需基团的解离状况和解离程度，以及催化基团中质子供体或质子受体所需的离子化状态，同时也可影响底物和辅酶(或辅基)的解离状态和解离程度，从而影响到酶与底物的结合。

③引起酶的活性部位的构象改变。

（4）激活剂对酶促反应的影响

大多数能提高酶促反应速率的是无机离子或比较简单的有机化合物，许多金属离子和无机阴离子具有该功能，并且很多具有选择性。

（5）底物浓度对酶促反应的影响

中间络合物学说：催化某一化学反应时，酶首先和底物结合生成中间复合物(ES)，然后生成产物( P)，并释放出酶。

（1）1903年 V.C.R. Henri用蔗糖酶水解蔗糖做实验，研究底物浓度与反应速率的关系。当酶浓度不变时，可以测出一系列不同底物浓度下的反应速率，以反应速率对底物浓度作图，可以得到一个双曲线。

（2）从该曲线可以看出，当底物浓度较低时，反应速率与底物浓度的关系呈正比，表现为一级反应。随着底物浓度的增加，反应速率不再按正比升高，反应表现为混合级反应。当浓度达到相当高的时候，底物浓度对反应速率影响变小，最后反应速率与底物浓度几乎无关，反应达到最大速度（Vmax），表现为零级反应。