一、嵌合抗体的制备
嵌合抗体是指不同部分来源于不同的动物物种的分子，如具有来源于鼠类抗体的可变区以及人免疫球蛋白恒定区的抗体。其制备过程主要包括以下几个关键步骤：
1.可变区基因克隆：从产生目标抗原特异性抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA，通过RT-PCR扩增抗体基因的可变区（VH和VL），回收并纯化扩增产物。
2.嵌合抗体表达载体构建：改造含信号肽人Ig重链和轻链C区基因片段的单克隆位点，设计并扩增出重链和轻链的信号肽及恒定区基因片段，用酶切位点连接后，与pcDNA3.1-CA大片段连接，得到嵌合抗体真核双表达载体。
3.插入可变区基因：将纯化的VL和VH基因片段分别双酶切表达载体，连接、转化大肠杆菌，筛选出阳性克隆，构建成重组表达载体。
4.转染与筛选：将重组表达载体转染至哺乳动物细胞（如Sp2/0细胞），用含MTX的选择性培养基进行筛选，得到高表达嵌合抗体的克隆。
5.纯化与鉴定：从培养上清液中纯化嵌合抗体，用抗原和酶标羊抗人IgGFc片段抗体检测嵌合抗体的特异性及重组性。
二、嵌合抗体的应用
嵌合抗体由于结合了不同物种抗体的优点，如小鼠抗体的可变区能有效识别特定抗原，而人类的恒定区则具备较低的免疫原性，因此在生物医药领域具有广泛的应用前景：
1.肿瘤免疫治疗：嵌合抗体可以靶向肿瘤细胞表面的抗原，激活免疫系统对肿瘤细胞的攻击。例如，西妥昔单抗（Cetuximab）是一种含人类IgG1恒定区的人鼠嵌合性单克隆抗体，可竞争性结合EGFR细胞外配体区，阻断酪氨酸激酶活化，抑制肿瘤细胞EGFR的活化。
2.传染病治疗：利用嵌合抗体靶向病原体，发挥免疫中和作用，治疗病毒感染等疾病。
3.免疫诊断：嵌合抗体被广泛应用于各类免疫检测试剂盒中，用于检测抗原和抗体的存在。
4.自身免疫性疾病治疗：嵌合抗体可用于治疗风湿性关节炎等自身免疫性疾病，通过调节免疫系统的反应来减轻症状。
