荧光原位杂交（FISH）技术用于辐射生物剂量重建研究，通过高精度温控和自动化流程提升染色体畸变检测的灵敏度与稳定性，为辐射剂量评估提供可靠依据。
以下是具体分析：
技术原理与优势
FISH技术利用荧光标记的核酸探针与染色体或DNA纤维切片上的靶DNA杂交，通过荧光显微镜观察杂交信号，实现对特定DNA序列的定性、定量及相对定位分析。
相较于传统放射性原位杂交，FISH技术采用荧光素标记，避免了放射性污染风险，同时具备定位准确、直观可视的优点。在辐射生物剂量重建中，FISH技术能够检测染色体畸变，如双着丝粒体等，这些畸变是辐射暴露的敏感生物标志物。
技术改进与应用
传统FISH技术在探针变性温度控制、人工操作重复性及流程复杂性方面存在局限。
通过引入全自动原位杂交系统（如威尼德HB-500），可实现±1℃精密温控与全自动流程，显著提升染色体畸变检测的稳定性。
该系统搭载的第三代热盖控温技术可维持玻片全域温度均匀性≤±0.8℃，配合湿度锁定装置，将荧光信号强度CV值从手工操作的18.7%降至5.2%，双着丝粒体检出效率提升至98.3±1.2%。
在辐射生物剂量重建中，FISH技术已应用于离体剂量效应关系研究及医用诊断X线工作者剂量重建。
临床价值与挑战
FISH技术为核事故医学应急提供了可靠的剂量重建解决方案，其变异检出灵敏度达单细胞级，显著优于传统方法。
然而，该技术仍面临探针选择、易位染色体识别标准及复杂畸变对易位率影响等挑战。
例如，不同染色体探针组合可能导致双着丝粒率与易位率的比率差异，复杂畸变随剂量增加而增多，可能影响低剂量点的剂量效应曲线准确性。
