细胞划痕实验，又称为伤口愈合实验，是一种常用的体外实验方法，用于评估细胞迁移能力的指标。
其基本原理是在培养皿中的单层细胞上机械划造一个空缺区域，随后观察细胞在培养液中的迁移情况。
在实验过程中，划痕边缘的细胞会发挥迁移作用，逐渐填补划痕区域，从而使划痕部位逐渐闭合。通过记录不同时间点的图像并进行定量分析，可以客观评价细胞迁移速度和能力的变化。
由于其操作简便、成本较低且具有较高的可重复性，细胞划痕实验被广泛应用于研究药物、基因等外部因素对细胞迁移过程的影响，为细胞生物学领域的研究提供了重要的实验手段。
一、实验材料准备
1.细胞培养板（如6孔、12孔或24孔板）
2.细胞培养基（根据细胞类型选择适当的培养基）
3.PBS缓冲液（无钙镁）
4.无菌刮刀或移液枪头
5.显微镜和照相设备
二、细胞培养
1.细胞选择
根据研究目的选择适合的细胞系，如成纤维细胞、上皮细胞或癌细胞等。
2.细胞接种
将细胞接种到培养板上，确保细胞均匀分布。培养至细胞密度达到90-100%汇合。
3.细胞检查
在进行划痕前，检查细胞状态，确保细胞健康、无污染。
三、实验步骤
1.细胞刮痕
使用无菌刮刀或100-200 µL的移液枪头在细胞单层上划一条直线，形成划痕。注意保持划痕的宽度一致，避免在划痕过程中损伤过多细胞。
2.清洗细胞
用无钙镁的PBS缓冲液轻柔地清洗划痕区域，去除被刮下来的细胞碎片，避免影响后续观察。
3.添加培养基
更换新的培养基，确保细胞处于适宜的生长环境中。
4.时间点记录
使用显微镜在不同时间点（如0小时、6小时、12小时、24小时等）对划痕区域进行拍照记录。
四、数据分析
1.图像处理
使用图像处理软件（如ImageJ）对拍摄的图片进行分析，测量划痕宽度的变化。
2.数据统计
计算不同时间点的划痕面积，绘制细胞迁移曲线，评估细胞迁移能力
五、注意事项
1.划痕的一致性
尽量保持每次划痕的宽度和深度一致，减少实验误差。
2.细胞健康
确保细胞在实验过程中保持健康状态，避免由于细胞死亡导致的数据偏差。
3.重复实验
为保证数据的可靠性，建议进行至少三次重复实验，并取平均值进行分析。
