用WB的方法检测血清或血浆中某种蛋白的含量，最关键的问题是要将样本进行电泳前处理。
具体操作步骤如下：
1.常规分离血清或血浆，3000rpm离心15min,取上清。
2.测血清或血浆蛋白浓度。
3.用蛋白裂解液或PBS稀释至所需浓度，一般为5ug/ul（建议在预实验的时候做几个上样量的梯度进行观察）。
4.加入适量loading buffer,100℃煮5min。
注意事项：
1.注意防止蛋白降解。
2.在应用WB法检测血清或血浆中蛋白时，需要了解该蛋白在血浆或血清中的丰度问题，以方便选择适当的上样质量。
另外，在应用血清或血浆样品做WB时，低丰度蛋白检出率极差，白蛋白会干扰电泳的分辨率和转膜效率。
所以在进行血清或血浆样本的WB实验前，将白蛋白去除可以有效的提高低丰度蛋白的检出率，市面上有很多商品化的去除试剂可供选择。
3.由于血浆或血清中很难找到一个稳定表达的蛋白，常见的在组织中比较常用的内参蛋白如肌动蛋白，GAPDH等，严格讲并不适合血浆或血清，如下图所示，血清样本WB检测推荐使用Transferrin作为内参蛋白。
