在进行Western blot实验时，loading buffer的作用非常重要。
1.帮助蛋白质变性，
2.在电泳过程中稳定蛋白质的结构
3.转膜和免疫检测过程中提供可视化的标记。
loading buffer通常包含一些成分，如SDS（十二烷基硫酸钠）、甘油、β-巯基乙醇和染料等。
如果没有加入loading buffer就直接煮沸样品，可能会导致以下问题：
1.蛋白质聚集：缺少density agent，蛋白质可能无法沉入凝胶孔底，影响分离效率。
2.电泳不均：缺乏指示染料，难以判断电泳进程，可能导致过度或不足电泳。
3.二级结构保留：未变性蛋白质仍保留部分天然结构，迁移率不同于变性蛋白质，影响实验一致性。
4.蛋白质降解风险：缺少保护剂，蛋白质可能更容易发生不可逆变性或降解，降低Western blot检测灵敏度和准确性
如果不小心将蛋白原液煮沸，可尝试以下方法进行修复：
1.稀释：尝试将煮沸的蛋白原液稀释至较低的浓度。较低的浓度可以使蛋白质更易于溶解，并减少蛋白质聚集的可能性。
2.重新准备样品：如有足够的材料，重新收集样品并准备新的蛋白样品。这可以确保蛋白质没有被过度变性和聚集，并提高Western blot实验的可重复性。
