一、培养基特性
1.化学成分限定:HEK293培养基多为化学成分限定(Chemically Defined)培养基,不含血清、水解物及任何动物来源的成分。这种培养基的成分明确,有利于实验的重复性和稳定性。
2.支持高密度悬浮培养:HEK293培养基能够支持HEK293细胞在高密度下进行悬浮培养,实现细胞的高效增殖。
3.促进蛋白表达:使用HEK293培养基进行悬浮培养,可以实现重组蛋白、慢病毒、腺病毒等的高水平表达。
二、培养基应用
1.多种亚型适用:HEK293培养基适用于多种亚型的HEK293细胞,如HEK293F、HEK293T、HEK293H、Expi293等。
2.培养工艺多样:HEK293培养基可用于HEK293细胞的复苏、传代、高密度强化工艺培养及灌流培养等多种培养工艺。
三、培养条件与操作
1.培养条件:进行HEK293细胞悬浮培养时,通常需要在36.5-37℃、5%-8% CO₂的条件下进行。摇床转速和生物反应器的培养条件(如溶氧、pH、转速等)也需根据具体实验需求进行调整。
2.操作注意事项:在培养过程中,需要密切关注细胞的生长状态、活率和密度等参数,并根据实际情况调整培养条件。同时,还需注意无菌操作,避免污染。
四、培养基优势
1.提高蛋白产量:与传统的含血清培养基相比,HEK293培养基能够显著提高重组蛋白的产量和纯度。
2.降低成本:由于HEK293培养基不含血清等昂贵成分,因此可以降低培养成本。
3.避免污染:无血清培养基的使用可以避免血清源性污染以及血清来源和批次不稳定造成的实验/生产批次差异。