一、多肽硫酯的重要性
多肽硫酯在蛋白质化学合成中扮演着关键角色，特别是在自然化学连接（Native Chemical Ligation, NCL）策略中。NCL允许无保护的肽片段在水相中高效、选择性地连接，其中一个片段的C端为硫酯，另一个片段的N端为半胱氨酸。多肽硫酯的制备是实现NCL的关键步骤之一。
二、多肽硫酯蛋白合成新技术
1.N→S酰基转移反应
伦敦大学的Macmillan研究组发现了一种新的多肽硫酯制备方法，即N→S酰基转移反应。这种方法能够从末端为Xaa-Cys序列的天然多肽中制备多肽硫酯，其中Xaa可以是Gly、His或Cys。
该反应产生的硫酯已经成功应用于合成具有生物活性的人β-defensin 3类似物和人Hepcidin，并且与O-和N-糖肽合成以及磷酸化蛋白半合成相容。
研究还发现，增加相对少量过量的半胱氨酸能逆转硫酯的形成，表明硫酯形成和NCL能在相同反应条件下发生。
2.Fmoc-SPPS方法制备多肽硫酯
传统的Boc-SPPS方法制备多肽硫酯存在操作困难，且与糖肽和磷酸化肽等含酸敏感的翻译后修饰多肽硫酯制备不相容。因此，发展高效的Fmoc-SPPS方法制备C端多肽硫酯具有重要意义。
科学家们发展出多种基于Fmoc-SPPS的方法制备多肽硫酯，如利用分子内O到S的酰基迁移、利用Kenner's Safety-Catch Linker等。这些方法解决了多肽合成过程中硫酯的稳定性问题，提高了多肽硫酯的制备效率。
3.多肽酰肼法
清华大学的研究团队提出了一种基于多肽酰肼的蛋白质制备方法。该方法将C端具有酰肼基团的第一肽与N端为半胱氨酸的第二肽连接，通过一系列化学反应将酰肼基团转化为硫酯基团，进而实现肽片段的连接。
该方法避免了现有技术中采用Boc-SPPS方法合成硫酯化物中的弊端，提高了多肽硫酯的稳定性，并且可以通过生物合成方法合成C端具有酰肼基团的多肽片段，提高了生产效率。
三、多肽硫酯蛋白合成新技术的应用前景
多肽硫酯蛋白合成新技术在生物医药领域具有广泛的应用前景。通过该技术，可以高效地合成具有特定结构修饰的目标蛋白，为新药研发、疾病诊断和治疗提供有力支持。例如，利用该技术可以合成具有抗肿瘤、抗病毒等生物活性的多肽药物，为癌症和传染病的治疗提供新的手段。
四、结论
多肽硫酯蛋白合成新技术为蛋白质化学合成领域带来了新的突破。通过不断优化和创新，该技术将进一步提高多肽硫酯的制备效率，拓展其在生物医药领域的应用范围。
