细胞污染：细胞培养正常情况下建议每日低倍镜高倍镜下观察，便于及早发现及早处理污染 细胞确定是否污染？
一、细菌污染
培养基短时间内变黄，变浑浊，培养基表面出现漂浮物；细胞生长停滞，逐渐脱落死亡；显微镜下可见高速颤动，作布朗运动的细小颗粒。
二、霉菌污染
培养基一般不浑浊，肉眼可见菌落；显微镜下可见菌丝分布于细胞间
三、酵母菌污染
培养基变浑浊；显微镜下可见念珠串状颗粒散在于细胞周围
四、支原体污染
培养基短时间内变黄；细胞一般无明显改变；显微镜下可见胞浆小颗粒或空泡
五、黑胶虫污染
培养基一般无明显改变；显微镜下可见作布朗运动的黑色小点
一旦确定污染：
（污染的细胞建议直接丢弃❗️❗️❗️高浓度双抗培养细胞性质可能会受到影响，甚至皱缩脱落，若不死心可以尝试拯救下）
①弃培养基，彻底吸净
②加入含10%双抗DPBS2-3ml浸泡5分钟，彻底吸净
③胰酶稀释一倍室温消化3分钟，清除贴壁污染，彻底吸净
④重复步骤2
⑤细胞消化传代，离心机800转低速离心
⑥弃上清，重悬，离心机800转低速离心
⑦加入10%双抗完全培养基（支原体清除剂）重悬，除菌滤膜培养瓶培养
⑧一天一换液（上述方案是在细胞极其珍贵情况下的无奈之举，在细胞易于获得的情况下还是建议直接弃掉污染的细胞，不仅节约时间，而且风险更小）
