2024/12/2 11:28:00

1、试剂盒的应用种属、检测样本的种类

除试剂盒特别说明外,一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有:血清和血浆(不同抗凝剂),细胞上清,和细胞裂解液,试剂盒中不同样本的稀释液不混用。

2、试剂盒的检测范围

也就是标准曲线范围,特别要注意待测样本浓度是否落在标准曲线范围内,对于浓度很高的样本,可以先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。

3、特异性

ELISA试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分--抗体对有关。若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,如有条件最好是使用双单抗。

4、灵敏度

灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的最低量的能力,用户可根据自己样本中待检指标的含量/浓度选择合适的试剂盒,如果待检指标含量很低,一般的试剂盒不能满足要求,建议选择高敏的ELISA试剂盒。

5、重复性

科学实验讲求重复性,ELISA试剂盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。

6、简便性

试剂盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利,越容易受到用户欢迎。

7、美誉度

一个品牌不光要有知名度,更重要的是美誉度。通过行业调查公司以及网络,相关宣传资料等可以找到美誉度高的ELISA试剂盒供应商,这个反映的不仅是产品质量的问题,对供应商的售前售后服务也是一个非常严格的检验。

8、文献引用

产品的文献引用特别是高质量的SCI文章引用是很多用户都关心的问题,这是业界对产品认可的一个非常重要指标,而且对相关用户的科研有一定的借鉴作用。

其实,规范严格的ELISA厂商会对产品进行质控,一起来了解下这些指标的含义吧!

1. 回收率:将已知的低、中、高浓度的重组蛋白掺入到待测样本中,掺入前后测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率,以此验证检测的准确度。复杂的样本基质,如血清、血浆中可能含有干扰因子,影响准确定量目标分析物。优秀的ELISA试剂盒回收率通常在80-120%之间(视为无可计量的基质干扰),合格试剂盒在60%左右。

2. 稀释线性:样本稀释后,最终分析物浓度应该相同,这个就是公认的实验线性。干扰因子会影响实验的线性,除非在研发环节克服这些干扰效应。我们为每个验证过的样本类型用试剂自带的稀释液进行系列稀释。结果用检测值和理论值的百分比表示,线性介于80-120%为理想结果。

3. 精密度:在相同条件下,对被测量物(高、中、低浓度)进行多次反复测量,测得值之间的一致(符合)程度。这一特性具有重要意义:

1)保证一项试验中得到的结果是准确的,并且一次实验到下一次实验结果可重复;

2)判定两个结果相同还是不同。通常用变异系数(coefficient of variation, CV)来表示。优秀ELISA试剂盒的酶标板内变异系数(CV)小于5%,酶标板间变异系数小于8%。

4. 校准:每个试剂盒包含的标准品都经过高纯度蛋白的校准。联科生物标准品质量是通过与母校准品进行比较而制定。用于保证不同批次间试剂盒的一致性,所有批次的试剂盒均经过母校准品校对,不会出现结果偏差。

5. 特异性:抗体是特异的,只与相应抗原反应。实际制备的抗体却常有非特异性反应,这是因为抗原不纯造成的。多组分抗原之间存在共同的抗原决定簇,或者两个抗原决定簇结构类似能与同一抗体结合,均可出现抗体与异源抗原的交叉反应。

 

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