VHH抗体的制备

VHH抗体，又称为纳米抗体。具有高稳定性和耐性、高亲和力和高特异性、易于表达和改造、小尺寸、易于存储等特点。作为新一代纳米生物工具，用于生物医学的许多领域，包括生物分子材料、生物研究、医学诊断和免疫疗法。

噬菌体展示技术，这一分子生物学领域的创新方法，通过将外源性肽或蛋白质的DNA序列巧妙地嵌入噬菌体壳蛋白的某一结构基因中，实现了外源基因与壳蛋白同步表达。这一过程导致目标蛋白质与噬菌体壳蛋白紧密融合，进而在噬菌体表面呈现，为生物医药研究提供了一种高效的展示平台。

基于噬菌体展示技术的纳米抗体的制备过程如下：

①羊驼免疫：使用目的抗原对骆驼科动物进行免疫，效价合格采血分离PBMC；

②文库构建：PBMC提取总RNA、制备cDNA、PCR扩增VHH片段并构建到M13噬菌粒载体上，通过辅助噬菌体救援包装成完整的噬菌体颗粒并展示相应抗体序列；

③文库筛选：通过固相筛选、磁珠筛选、细胞筛选等不同的筛选方法和策略去除非特异性抗体，获得高亲和力和高特异性的VHH抗体。