一、磁珠标记
原理就是用结合了磁珠的抗体去标记细胞,让目的细胞带上磁珠,也可以正向选择死细胞,通过磁场結合了磁珠与没结合磁珠的细胞分离开来。
MACS是细胞分选的重要手段,优点是细胞活性好,缺点就是能分选的細胞类型有限,且成本较高。
二、流式分选
FACS, 也就是流式分选,与流式分析一致。利用荧光素标记不同的分子,通过调节合适的电压、补偿等,通过荧光將目的细胞与非目的细胞区分开来。
三、沉降法
部分悬浮细胞如NK92成团生长,成团的细胞状态较好,单个细胞基本没有増殖能力,根据这一特性,便可以将细胞悬液收集在离心管中,注意动作要轻柔,不要将细胞团吹散,將离心管直立,观察离心管底出观“白雾” 层时,可小心将上清去除,来收获狀态良好的细胞团。
四、低速离心法
一般来说,悬浮细胞中的死细胞及细胞碎片的密度相对较低,此时,可以通过低速 (500-800rpm)来去除一些上清中的死细胞, 每欢传代或换液进行此操作,使活细胞有生长优势,可以慢慢提高活细胞比例。
五、活细胞短暂贴壁法
可以用一种叫Con.A(刀豆球蛋白)来包被培养皿或培养瓶,悬浮細胞中的活细胞可短暂贴壁,此时弃去上清,一段时间后,细胞又可以重新悬浮。市面上有一些经过特殊处理的养贴壁细胞的培养瓶也可达到这种效果,但是建议使用之能根据所养的悬浮细胞生长状况,测试一下分离效果。