蛋白电泳2倍样品处理液的保存条件需根据其成分特性、使用频率及实验需求综合确定,以下是具体保存建议及注意事项:
一、推荐保存条件
1.短期保存(1-4周)
温度:4℃冰箱冷藏
环境:避光、密封(如使用螺旋盖试管或封口膜)
适用场景:频繁使用(如每周多次实验),可减少反复冻融对成分稳定性的影响。
2.长期保存(1个月以上)
温度:-20℃或-80℃冷冻
操作:分装成小体积(如1mL/管),避免反复解冻
适用场景:低频使用或需长期储备,可延长有效期至6-12个月。
二、关键成分对保存的影响
1.还原剂(β-巯基乙醇/DTT)
特性:易氧化失效,尤其在高温或光照下。
建议:
短期冷藏可减缓氧化,但长期仍需冷冻。
若处理液含DTT(比β-巯基乙醇更稳定),可适当延长冷藏时间。
2.SDS
特性:低温下可能析出结晶,但加热后可重新溶解,不影响性能。
建议:
冷冻保存时,使用前需完全解冻并混匀。
避免反复冻融导致SDS结晶聚集。
3.溴酚蓝
特性:对光敏感,长期光照可能褪色。
建议:始终避光保存(如用棕色瓶或铝箔包裹)。
三、保存注意事项
1.避免污染
使用干净移液器,防止交叉污染。
每次取用后立即密封,减少空气接触。
2.分装策略
根据实验用量分装,避免反复解冻整瓶溶液。
例如:将100mL处理液分装为10×10mL小管,每次仅解冻1管。
3.解冻与混匀
冷冻保存后,解冻需完全(至液态),并涡旋或颠倒混匀。
避免局部SDS结晶未溶解导致浓度不均。
4.有效期监控
标记分装日期,优先使用旧批次。
若出现异味(如还原剂氧化产生的硫味)、变色或沉淀,需弃用。
四、不同场景下的灵活调整
1.实验室条件有限时
若无冷冻设备,可短期(1-2周)4℃保存,但需增加质量检查频率(如观察是否浑浊)。
添加额外还原剂(如临用前补充β-巯基乙醇)可部分补偿氧化损失。
2.高湿度环境
确保容器密封严实,防止冷凝水进入稀释溶液。
3.运输需求
短途运输可冰袋冷藏;长途运输需干冰冷冻,并使用保温箱。
五、示例保存方案
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保存方式 |
温度 |
分装建议 |
有效期 |
关键操作 |
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短期使用 |
4℃ |
整瓶或按周用量分装 |
1-4周 |
避光、密封,每周检查质量 |
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长期储备 |
-20℃ |
1mL/管 |
6-12个月 |
解冻后混匀,优先使用旧批次 |
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高频实验 |
4℃+冷冻 |
日常用量冷藏,储备冷冻 |
- |
每日取用冷藏部分,定期补充冷冻库 |