2025/12/1 12:02:00

宫内干细胞移植治疗先天性脊椎裂胎鼠的新方法已成功建立,该方法通过胎仔外科、显微外科及显微注射技术,将转染绿色荧光蛋白基因的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植至胎鼠脊髓中,实现了较高的干细胞成活率,为神经管畸形治疗提供了新思路。

具体方法

1.实验动物与模型制备:

选择孕16、17、18天的雌性大鼠,通过维甲酸口服给药制备先天性显性脊椎裂胎鼠模型。

2.干细胞移植技术:

采用胎仔外科、显微外科和显微注射技术,将转染绿色荧光蛋白基因的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植到脊椎裂胎鼠的脊髓中。

移植过程中,需精确控制显微注射针的位置和深度,以确保干细胞准确注入脊髓组织。

3.术后观察与评估:

孕20天时剖腹取胎,计算胎鼠成活率。

制作胎鼠脊髓切片,在荧光显微镜下观察胎鼠脊髓中干细胞的移植情况,包括干细胞的存活、迁移和分化。

 

研究成果

1.干细胞成活率:

接受手术的孕鼠86只,孕20天成活81只,成活率为94.2%。

行干细胞移植的先天性显性脊椎裂胎鼠258只,共取出198只,成活率为76.7%。其中,胎龄为16、17、18天的胎鼠成活率分别为72.1%、77.3%、87.0%。

荧光显微镜下观察胎鼠脊髓切片,可见呈现绿色荧光的MSCs,干细胞移植成活的胎鼠195只,成活率为98.5%。

2.干细胞分化情况:

移植的MSCs不仅分化为不同的神经细胞,包括神经干细胞、神经元和神经胶质细胞,而且还可以分化为肌原细胞。

分化率在P10-14代MSCs明显高于P3-6代MSCs,在孕16天移植明显高于孕17天和18天。

 

方法优势

1.高成活率:该方法实现了较高的干细胞成活率,为先天性脊椎裂的治疗提供了有效的细胞来源。

2.多向分化潜能:移植的MSCs具有多向分化潜能,能够分化为多种神经细胞类型,为脊髓组织的修复和再生提供了可能。

3.早期干预:宫内干细胞移植能够在疾病早期进行干预,为先天性脊椎裂的治疗提供了新的时间窗口。

 

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