一，实验知识介绍
质粒抽提方法即去除 RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。
提取质粒DNA的方法有很多种，从提取产量上分可分为微量提取、中量提取、大量提取。
利用PureLink® HiPure Plasmid Filter DNA Purification Kits 中提质粒。
二，实验步骤：
1.Equilibrate：加15ml EQ1至PureLink® HiPure Midi Column管中。
2.Harvest：分装已过夜摇菌的LB培养基至50ml离心管，离心（4000 xg ，10min），其上清。
3.Resuspend：加10ml R3溶解沉淀，摇匀，禁涡旋。
4.Lyse：加10ml L7,摇匀，室温静置5min。
5.Precipitate：加10mlN3,摇匀。
6.Clarify：倒入PureLink® HiPure Midi Column管中，利用重力作用留下。
7.Wash：丢弃内部滤芯。向色谱柱中加入20毫升洗涤缓冲液(W8)。
8.Elute：将无菌15毫升离心管放在柱子下面。向色谱柱中加入5mL洗脱缓冲液(E4)。让溶液通过重力流排出。
9.Precipitate：在洗脱液中加入3.5毫升异丙醇。将DNA与异丙醇在室温下孵育2分钟。将试管在>12,000×g的温度下4°C离心30分钟。
10.Wash：去掉上清液。在颗粒中加入3mL 70%乙醇。将试管在>12,000×g的温度下4°C离心5分钟，取出上清液。
11.Resuspend：将颗粒风干10分钟。将纯化的DNA重新悬浮在100~200µL的TE缓冲液中。将质粒DNA保存在-20°C的中。
