细胞划痕实验检测【细胞的迁移能力】
1.PBS清洗细胞,胰酶消化(消化时间根据细胞性质而定)
2.培养板画线用记号笔在无菌6孔板底部笔直的、均匀的画3条横线。
3.接种细胞取生长状态良好的细胞接种于已画线的6孔板中,在培养箱中培养过夜。此时细胞的生长融合率正好达到90-100%单层细胞。
4.细胞划线用200pL 移液枪的枪头比着直尺,垂至于6孔板中底部的横线自上而下划过细胞层。注意用力要均匀,枪头不能倾斜。
5.冲洗细胞弃培养基,用无菌PBS 轻柔的清洗细胞2次,洗去不贴壁的即刚刚划掉的细胞。加入新鲜的无血清的培养基,继续于37°C培养箱中培养。
6.加药处理细胞正常处理、培养细胞
7.拍照观察在倒置显微镜下分别于0h、12h、24h和36h对划痕进行定点拍照评估各组细胞的迁移情况。