收到了干粉质粒，或者问别人要了液体的质粒，如何才能让质粒扩增下去，让质粒子子孙孙无穷尽？那就是让细菌（感受态）吃掉质粒，让细菌生产更多质粒。今天来讲一下不涂平板的懒人质粒转化的步骤和注意事项。
一、准备质粒和感受态
如果是干粉质粒，5000rpm离心1min，加入无菌水（或者拿提质粒的试剂盒里的TB buffer）溶解。
从-80℃拿出感受态，放置于冰上融化。加入2ul质粒，不用吹打，轻轻操作，避免震荡。在冰上静置30min。
二、热激
42℃ 30s，之后冰上静置2min。
原理：热冲击导致细胞膜流动性增加，让细胞膜暂时变得可透，从而允许外源DNA（质粒）进入细胞内部。注意时间不要过长，否则影响感受态的活性。之后置于冰上以稳定细胞膜。
三、恢复培养
将混合物转移到含有适当抗生素的LB培养基或SOC培养基中，并在37°C的摇床上培养45min-2小时，以使细胞恢复生长。
原理：热冲击后，细胞膜需要时间恢复到正常状态。在适宜的培养基中培养，提供必要的营养和环境条件，使细胞修复可能的损伤，并开始复制和表达新进入的质粒DNA。
四、筛选转化细胞，摇菌过夜
1.正规做法：将上一步的菌液涂布在含有相应抗生素的固体培养基上。培养过夜，挑选长出的单克隆菌落进行后续摇菌。
2.懒人做法：直接将上一步的菌液接种到含有抗生素的LB液体培养基中。在37°C的摇床上培养过夜，依靠液体LB培养基里的液体筛选正确转化的菌，一般不会有问题。如果后续提取质粒浓度较低或者细胞实验效果不佳再考虑涂平板挑单克隆。
注意摇菌时间不要超过16小时，否则细菌可能已经死亡，影响质粒的含量和质量。
