一、泛素基因克隆
1.基因来源：研究从SeMNPV中克隆了泛素基因（ubiquitin）。
2.基因序列：该基因编码区全长243bp，编码80个氨基酸残基，预计蛋白质分子量为9.4kDa。
二、表达载体构建
1.载体选择：将泛素基因克隆到原核表达载体pET-28a上。
2.转化宿主：将重组载体转化至大肠杆菌BL21（DE3）中。
三、诱导表达与验证
1.诱导表达：使用IPTG进行诱导表达，并对表达条件进行了优化，通过调整诱导时间和IPTG浓度以获得最佳表达水平。
2.表达验证：利用异源的泛素单克隆抗体进行Western blot实验，成功检测到目标蛋白的表达，证明所表达的蛋白为泛素蛋白。
3.抗体制备：为进一步研究，制备了特异性的泛素抗体。
四、进化分析
1.序列比对：通过计算机软件Gendoc对不同来源的泛素氨基酸序列进行分析。
2.进化特征：结果显示，病毒中的泛素与真核细胞中的泛素相比，氨基酸序列存在较大变化，推测杆状病毒的泛素基因在分子进化上可能具有独特途径。
