2024/10/9 8:49:00

Taq DNA聚合酶是从生活在温泉和热液喷口中的细菌T.aquaticus中提取获得的热稳定DNA聚合酶,它是第一个被发现并应用于PCR(聚合酶链式反应)的耐热DNA聚合酶。

Taq DNA聚合酶有多种类型,以下是一些主要的种类:

1.普通Taq DNA聚合酶:

这是最常用的Taq DNA聚合酶,用于一般的PCR扩增。

 

2.高保真Taq DNA聚合酶:这种酶具有较低的错配率,适合对PCR保真性要求较高的实验,如基因筛选、测序、突变检测等。高保真Taq酶的保真原理在于其具有3'到5'核酸外切酶的活性,能够校正错配的核苷酸。市面上主要有两类高保真酶产品:一类是混合型的高保真酶,将带有Proofreading活性的酶与普通Taq酶(用于提高扩增效率)混合起来;另一类是单一型的高保真酶。

 

3.热启动Taq酶(高特异Taq酶):这种酶在PCR循环变性之前处于非活性状态,必须经过高温才能激活。因此,在初始循环的变性之前它不会产生非特异性扩增,从而大大提高了PCR扩增的特异性。

 

4.高耐热Taq酶:对于某些模板变性温度较高、需要时间较长的PCR反应,可能需要使用高耐热性的Taq酶。例如,NEB公司的Vent和Deep Vent DNA聚合酶系列,它们是从海底火山口分离出来后克隆的,耐热性比普通Taq酶高三倍以上。

 

5.超长片段扩增Taq酶:对于需要进行基因组图谱、测序及分子遗传学研究的科研人员,可能会用到超长片段的扩增。Clontech公司的Advantage Genomic系列就提供了这样的超长片段扩增Taq酶,它能够扩增长达10kb甚至40kb的DNA片段。

 

这些不同类型的Taq DNA聚合酶在PCR反应中具有不同的特性和应用,可以根据实验需求选择合适的酶进行使用。

 

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