THP-1细胞系的培养与编辑涉及多个方面，以下是对这两个方面的详细阐述：

一、THP-1细胞系的培养

1.细胞描述

物种：人

组织：外周血

细胞形态：悬浮生长，单核细胞，正常形态为悬浮的体积较小、透亮的圆形细胞，少数聚团成葡萄状，粒粒饱满，轮廓清晰

细胞倍增时间：约30~48小时

2.培养条件

完全培养基成分：RPMI-1640+10%FBS（胎牛血清）+0.05mM β-巯基乙醇+1%P/S（双抗，即青霉素和链霉素）

培养环境：37℃、5%CO2

适宜细胞密度：培养密度维持在50万~100万细胞/毫升为宜；超过200万/毫升则需要传代

3.培养方法

细胞复苏

将保存在-80℃或液氮中的细胞取出，迅速放入37℃（或42℃）水浴锅中解冻。

配置培养基（RPMI 1640+10%FBS+1%P/S）。

将解冻后的细胞悬液加入离心管中，低速离心后弃去上清。

用新鲜完全培养基重悬细胞，接种到培养瓶或培养皿中，放入培养箱中培养。

补液与换液

培养基变黄时可补加适量（1~2mL）新鲜培养基进行补液。

补加1~2次之后，用离心的方式全部换液。

也可采用半换液法，即吸出部分旧培养基，加入新鲜培养基。

传代

摇晃培养瓶，把细胞摇匀，均分到两个瓶子里，每瓶再补充等量培养基。

或者离心后计数，按照40~50万细胞/mL的密度接种到新的培养瓶中。

传代比例通常为1:21:4，传代频次为23天传代一次。

冻存

预先配制好冻存液（通常含有DMSO和FBS）。

将细胞离心后去上清，用冻存液重悬细胞。

将细胞悬液转移至冻存管中，放入程序冻存盒，然后放入-80℃冰箱过夜，再放液氮长期保存。

冻存密度建议为200万~300万/mL，以提高复苏存活率。

4.注意事项

THP-1细胞对血清要求高，建议选用高质量的胎牛血清。

细胞密度低时生长较慢，可通过补液、换液或传代来维持适宜的细胞密度。

细胞在偏酸性环境中生长更快，当培养基稍微变黄（呈橘红色）时，是比较适合细胞生长的。

少量细胞贴壁属于正常情况，将细胞悬液转移至新瓶中即可。当贴壁细胞的比例高于20%时，说明细胞生长环境有异常，需排查培养箱设置、培养基成分以及培养器皿是否异常。

少量细胞聚团呈葡萄串状属于正常现象，特别是细胞密度较低时。更换血清品牌或增大血清比例（不超过20%）有助于解决聚团问题。不建议将聚团的细胞吹散，等待密度高时会自己分散开。

二、THP-1细胞系的编辑

1.基因编辑难点

THP-1是一种近四倍体的悬浮细胞，常规的基因编辑方法（如慢病毒法、质粒法等）在THP-1中阳性率很低。

2.基因编辑方法

由于CRISPR/Cas9易于构建、效率较高和在人细胞中的毒性较低，在基因编辑应用中备受青睐。

可采用化学修饰合成的sgRNA，降低RIG-I及一型干扰素通路的激活，从而最大程度上提高细胞存活率，保证被编辑细胞的表型不因一型干扰素通路的激活而受到影响。

通过简单的电转化的方式将RNP递送到细胞内，3天即可完成靶向基因编辑。

3.基因编辑应用

THP-1细胞系可用于急性单核细胞白血病的研究，通过基因编辑技术可构建相关疾病模型，为药物筛选和治疗研究提供有力工具。

综上所述，THP-1细胞系的培养与编辑涉及多个方面，需要严格控制培养条件、优化培养方法，并选择合适的基因编辑技术以实现高效的基因编辑。