一、TBST不建议高压的原因
TBST（Tris-Buffered Saline with Tween 20）是生物学实验中常用的一种缓冲液，尤其在Western Blot和ELISA等实验中作为洗涤液。然而，需要注意的是，当TBST在高压条件下使用时，容易引发一系列问题，其中最常见的就是吐温20（Tween 20）引起的起昙现象，影响缓冲液的稳定性和实验结果的准确性。
所谓起昙，就是一些聚氧乙烯类非离子表面活性剂，当温度升高到一定程度时，聚氧乙烯链与水之间的氢键断裂，导致活性剂的增溶空间减少，增溶能力下降，在水中的溶解度急剧下降，使得溶液由清变浊。
吐温类表面活性剂的浊点通常在70-100℃，而高压温度一般在121℃，所以观察到起昊现象也就不足为奇了。
通常加入处理方式为加入吐温后直接使用，或过滤除菌后使用。
二、TBST溶液在高压灭菌时为何会发生起泡现象？
TBST溶液通常不会自发产生起泡现象。起泡通常与溶液中的气体含量、搅拌速度或溶液的表面张力有关。如果在加热或剧烈搅拌TBST溶液时观察到起泡，这可能是由于溶液中溶解的空气在高温下逸出或搅拌过程中产生气体所致。
此外，Tween-20作为一种表面活性剂，可能会降低溶液的表面张力，使得气泡更容易形成。如果在实验中遇到起泡问题，可能需要调整加热温度或搅拌速度，以避免气泡的形成。
三、除了TBST外，还有哪些试剂在高压灭菌时也需要注意类似问题？
在实验室中，除了TBST（Tris缓冲盐水加Tween-20）之外，还有许多其他试剂在高压灭菌过程中需要特别注意，因为它们可能对高温或压力敏感，或者容易分解产生有害物质。以下是一些常见的试剂及其注意事项：
1. 含有挥发性有机溶剂的溶液：如甲醇、乙醇、异丙醇等，这些溶剂在高温下易挥发，可能导致容器内压力异常升高，甚至引起爆炸。
2. 缓冲液中的蛋白质和酶：高温可能导致蛋白质变性或酶失活，影响实验结果。
3. 含有还原剂或氧化剂的溶液：如亚硫酸盐、过氧化物等，高温可能加速其反应速率，导致溶液变质或产生危险气体。
4. 含有稳定剂的溶液：如EDTA、巯基乙醇等，高温可能破坏其结构，降低稳定效果。
5. 染料和荧光标记物：某些染料和荧光标记物对热敏感，高温可能导致颜色褪去或荧光强度下降。
6. 培养基和细胞培养相关试剂：高温可能影响微生物生长或细胞活性，特别是对于那些需要特定温度培养的生物样品。
7. 酸碱溶液：强酸或强碱在高温下可能喷溅，造成化学烧伤或污染环境。
8. 含重金属或其他有毒成分的溶液：高温可能增加这些化合物的毒性或挥发性。
在高压灭菌之前，应仔细阅读试剂说明书，了解其热稳定性，并采取适当措施，如使用耐高温的包装材料、调整灭菌程序或寻找替代品。如果必要，可以考虑使用过滤除菌代替高压蒸汽灭菌，以保护热敏感试剂。
