1、磁珠该怎么保存和运输？

a.2-8℃冷藏保存

通常冷藏柜或冰箱内温度并不均匀，尤其夏天更明显；部分冰箱开启自动除霜功能，冰箱壁和箱体中部的温度也会有显著差异。

磁珠试剂瓶放置于冰箱2-8℃保存时，要注意试剂瓶不能贴壁，避免冰箱启用除霜功能时造成悬液结冰失效。磁珠试剂瓶宜置于冰箱中部，避免靠壁。

b.避免长时间室温放置

长时间常温放置也会影响磁珠的回收性能，因此磁珠用完后请及时放回4℃，特别是一些免疫蛋白或链霉亲和素修饰的磁珠。

c.避光保存

一些磁珠需要避光保存，如修饰有荧光基团的磁珠。

d.避紫外线

室温平衡时应避免阳光直射，以防紫外线损伤；使用中也应避免紫外光照。

e.冷链运输
推荐冷链2-8℃运输。小包装产品用泡沫盒子加冰袋也能短时间运输，但冰袋和磁珠试剂瓶/管之间需用传热性能低的泡沫或塑料隔开，避免装磁珠的试剂瓶/管直接接触冰袋。

2、磁珠冷冻后会发生什么？

a.磁珠团聚易沉降

冷冻、干燥和离心都会引起磁珠团聚而无法再分散，导致磁珠性能失效。

b.结构破坏，性能失效

过低的温度(如-20℃)会破坏磁珠结构及表面修饰，影响磁珠抓取效率。

ⅰ.纯化磁珠DNA回收效率低，回收特异性下降，回收得到的DNA杂质多。

ⅱ.oligdt磁珠失去效能，不再特异性抓取mRNA，建库得到的文库为总RNA文库。

ⅲ.链霉亲和素磁珠失去效能，杂交捕获洗脱得到的文库捕获效率及低，文库浓度偏高。

3、免疫磁珠在使用过程中出现聚集或挂壁情况的原因？

a.正常情况

免疫／链霉亲和素磁珠具有带负电荷的表面，磁珠在低pH的洗脱缓冲液中发生聚集属于正常现象，不影响磁珠的正常使用。

b.非正常情况

ⅰ.可能是由于β-巯基乙醇、DTT、pH差值大等因素，影响磁珠的均一性，使得磁珠粘稠，导致聚集成块或出现挂壁的现象。

ⅱ.磁珠pH值异常

磁珠的pH值可能会因为受到酸碱性物质的影响而发生变化，导致结块。在使用磁珠时，要注意保持合适的pH值。

ⅲ.离心过久

在洗涤步骤中，磁珠离心时间过久，可能导致磁珠颗粒间的结合力增强，形成结块。磁珠在磁场中放置太久也会使磁珠牢固的结合在一起。

4、如何解决磁珠易粘附管壁的现象？

粘性可能是由于磁珠之间或磁珠与管壁之间的静电相互作用造成的。通常，建议使用低吸附率的耗材进行磁珠操作。

另外，建议在进行实验之前，用诸如Tween 20去污剂的非离子去污剂洗涤磁珠。这种处理可以降低磁珠的静电电势。

通常只需将Tween 20去污剂加入到磁珠中，最终浓度可达到0.1%，然后在不含去污剂的缓冲液中重悬并洗涤磁珠，就可以减少或消除这个问题。可能需要在Tween 20溶液中孵育，例如在室温下滚动孵育 5-10分钟。

在缓冲液中添加0.01%～0.1%(v/v)的非离子型去垢剂（如NP-40、Tween-20或TritonX-100）也可以有效降低磁珠对耗材的粘附。

5、磁珠可以吸附ssDNA和RNA吗？

不管双链DNA、单链DNA，还是RNA，都可以在溶液中解离出带负电的磷酸基团，因此都可以用磁珠进行纯化回收，但单链DNA和RNA都没办法进行片段大小筛选。

双链DNA的二级结果一般是一条较稳定的线性双螺旋分子，在PEG的存在下，解离出来带负电的磷酸基团多少和其长度正相关，而RNA和单链DNA，二级结构比较复杂，导致其裸露出来的负电基团无法跟长度呈正相关，所以没办法像DNA那样进行片段筛选。

另外RNA和DNA在不同pH下稳定性不一样，所以纯化RNA的磁珠buffer中pH和纯化DNA的磁珠是不一样的。
 

6、建库纯化磁珠可以纯化gDNA吗？
可以，但由于大DNA与磁珠结合的非常紧，建议尽量增加洗脱液体积和洗脱孵育时间、建议高温孵育和边洗脱边震荡。

7、用磁珠纯化RNA时，为避免RNA降解，可以放在冰上孵育么？
不可以，一般是置于4℃孵育并适当延长孵育时间。不推荐放置在碎冰上孵育。
 

8、磁珠的DNA结合能力怎么样？该担心磁珠不够么？
在目前的磁珠体系中，磁珠的吸附能力均为过饱和，不必担心磁珠结合能力不足的情况。根据已知的报道，每1μL磁珠可以结合7μg DNA。
 

9、如何提高磁珠在免疫沉淀反应中的特异性?
可以先将抗体与样品进行孵育，形成抗体-抗原复合物，再用ProteinA磁珠捕获复合物。

这种方法可以提高抗体与抗原的结合效率，并降低磁珠与样品接触的时间，从而提高沉淀产物的特异性。