厌氧培养箱是一种在无氧环境条件下进行细菌培养及操作的专用装置,它能提供严格的厌氧状态、恒定的温度培养条件和具有一个系统化、科学化的工作区域。
在本装置内操作培养,可以培养最难生长的厌氧生物,避免厌氧生物在大气中操作时接触氧而死亡的危险性。
(一)厌氧培养箱的结构
厌氧培养箱为密闭的大型金属箱,由缓冲室、手套操作箱两个部分组成,操作箱内还附有小型恒温培养箱。
1.缓冲室 是一个传递箱,具有内、外两个门,在其后部与一个间歇真空泵相连,缓冲室随时可自动抽气换气造成无氧环境。在实际工作中,先将标本、培养基等放进缓冲室内,使它们变为厌氧状态后再移入操作室。在缓冲室的后部,连接有厌氧气体管。
2.手套操作箱 其前面装有塑料手套,操作者双手经手套伸入箱内操作,使操作箱与外界隔绝。操作箱内侧门与缓冲室相通,由操作者用塑料手套控制开启。当标本、培养基等在缓冲室内变为厌氧状态时,便可打开内门将它们移入工作室。操作工作室内设有小型细胞培养室。
3.小型恒温培养箱 厌氧培养室内的温度通常固定为35℃,但亦可变,变化范围是“(室温±5℃)~70℃”,控制精度为±0.3℃。当温度超过此温度时,培养箱会发出报警。
(二)厌氧培养箱的使用与注意事项
所有要转移的物品被放入缓冲室后,关闭外门。
按下“Cycle Start”钮即可自动去除缓冲室中的氧气。经循环换气的三个气体排空阶段和两个氮气净化阶段,使缓冲室气体达98%的无氧状态,再经缓冲室气压平衡。
当操作箱与缓冲室平衡,厌氧状态灯显示为ON,此时即可将内门打开,钯催化剂将除去余下的少量02。
操作者经手套伸入箱内进行标本接种、培养和鉴定等全部工作。
厌氧培养箱使用的相关耗材必须及时更换或处理:三层催化剂片第一层活性炭的使用寿命仅为三个月,不可重复使用;钯催化剂片使用寿命为两年,每个星期需再生一次(方法是将其置于160℃标准反应炉中烘烤两个小时);第三层干燥剂片使用寿命为两年,每星期需再生两次(将其置于160℃标准反应炉中烘烤两个小时)。