组织石蜡包埋切片和 HE 染色的基本流程
一、 取材和固定
取材后经固定 12 小时（如果 4%多聚甲醛灌注取材的后固定 6~8 小时）以后，流水冲洗 1 小时，置于 70%~80%乙醇中，可长期保存。
二 、脱水和包埋
1、70%乙醇 0.5h
2、80%乙醇 0.5h
3、85%乙醇 0.5h
4、90%乙醇 0.5h
5、95%乙醇（二道） I 0.5hII 0.5h
6、无水乙醇（二道） I 0.5hII 0.5h
7、二甲苯（二道） I 30minII 30min
（注：组织块偏大脱水透明时间可适当延长）
8、浸 蜡（50~52°C）（二道） I 60minII 60min
7、包埋：注意温度、切面。
三、 切片
修、切、展、贴、烤（烤片 55~60°C） 烤片 1h
四、 HE 染色
1、二甲苯脱蜡 五道，每道 5~10 分钟
2、无水乙醇 I 5minII 5min
3、95%乙醇 I 5minII 5mn
4、80%乙醇 5min
5、70%乙醇 5min
6、纯净水 3~5min
7、Harris 苏木素液 5min（冬天可适当延长，比如 20min）
8、水洗 1~3min
9、0.5%盐酸酒精分色 3~10seconds，镜下观察
10、饱和磷酸氢二钠溶液反蓝 10min
11、70%乙醇 5min
12、80%乙醇 5min
13、伊红液（95%乙醇溶液） 3~30seconds
14、烤干，中性树胶封片。
苏木精—伊红染色法简称 HE 染色法，它是最常用的普通染色方法。苏木精
（hematoxylin）是阳离子染料，将细胞核内的嗜碱性物质染成蓝紫色。伊红
（eosin）是阴离子染料，将细胞质和胶原纤维等染成粉红色。
HE 染色注意事项：
1. 染色时调节 pH 值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长，组织酸化而影响细胞核着色。因此，要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理 10-30min，这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳，可在伊红溶液中滴加 1-2 滴冰醋酸。
2. 切片染苏木精后，分色这一步是关键，应在显微镜下控制进行，一般以细胞核染色清楚（晰）而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅，应重新染色后再行分色。
3. 切片经酒精脱水后，入二甲苯时可出现白色不透明状态，此为脱水不彻底，应将切片退回无水酒精，更换酒精、二甲苯，以求彻底脱水与透明。
4. 在染色过程中不要让切片干燥，以免切片收缩、变形，影响神经元形态。
5. 切片从二甲苯取出或进入二甲苯前，切片周边均应擦干净或吸干多余水分。
6. 最后封固时，要用中性树脂，防止日后褪色，盖片要选大于组织块的面积，如漏出一部分不久将会褪色，所用树脂浓度要适当，树脂封固时不能有气泡。苏木精—伊红染色法简称 HE 染色法，它是最常用的普通染色方法。苏木精（hematoxylin）是阳离子染料，将细胞核内的嗜碱性物质染成蓝紫色。伊红（eosin）是阴离子染料，将细胞质和胶原纤维等染成粉红色。
