竞争法试剂盒优势:灵敏度高、上样量只需50μL、仅需要1.5h操作时长、存储方便、试剂盒性能稳定
适用范围:血清、血浆、细胞上清液或其他生物体液
ELISA试剂盒:
1、单步清洗,一步上样
2、上样量只需50μL
3、仅需90min操作时长
4、灵敏度高、性能稳定
5、存储方便
PS:本次实验使用96T,如不需要使用整块板,可拆下所需板条
一、标准品稀释及样品准备
样本4℃ 1000g 离心5min
标准品4℃ 10000g 离心1min
1mL标准品&样品稀释液溶解标准品,静置1-2min,取7支空EP管,每管加入500μL标准品&样品稀释液。
静置后,标准品混匀,将液体离心至底部(800g 离心1min)
取同体积标准品母液稀释,涡旋混匀,依次倍比稀释标准品,最后一管为空白
二、酶标抗体工作液制备
取5940μL酶标抗体稀释液,加入60μL离心过的酶标抗体浓缩液,稀释100倍后,备用
颠倒混匀20次,备用
三、标准品及样本,酶标抗体点样
由低到高浓度,悬空加入,每孔50μL
处理后的样品上清溶液,悬空加入,每孔50μL
酶标抗体工作液,悬空加入,每孔50μL,覆膜后,标记简称。
提前预热,注意温度:37℃,孵育60min
1*洗液配制,取288mL双蒸水,取12mL 25*浓缩洗涤液,加入烧杯,磁力搅拌器混匀5-10min
平衡取出酶标板,勿触摸板条底部,轻撕抚摸,避免液体溅出,甩尽孔板内液体,洗涤(参数设置:洗涤次数5次、洗板条数12条、洗涤液量350μL/孔,震板5s)
拍干液体,更换吸水纸
四、显色
悬空垂直加入底物溶液,每孔90μL,覆膜后,标记简称,37℃孵育15-30min。平衡取出酶标板,切勿触摸板条底部。
标曲前四孔出现明显蓝色梯度。
五、终止反应
悬空垂直加入终止液,每孔50μL,加入终止液时可看到蓝色立转为黄色。
六、数据处理
轻轻擦拭板底,放入酶标仪中,上机操作,