2024/11/29 9:03:00

N端作为蛋白质合成的开始部分,在其结构中也起到了关键性的作用,相应的,想要了解蛋白质合成的开始部分,可以对N端的序列进行蛋白质测序(氨基酸测序),也成为N端测序,利用这种技术可以获得相关信息。这种技术在很多蛋白断裂研究、相关机制及新药研发等多个领域展现出广泛应用价值。

除了能够对蛋白合成的开始部分进行分析之外,利用该技术也可以得知一些特定蛋白的存在与否。通过分析蛋白质测序(氨基酸测序)结果数据,对于后续的纯化过程,以及结构方面都有帮助效果,还能够有利于进行蛋白断裂研究和药物的研发。

 

原理:

该技术基于Edman化学降解法进行Edman测序。在此方法中,蛋白质的N端与化学试剂(例如PITC)发生偶联,形成PTC-肽,随后在碱性环境下环化裂解,产生ATZ中间体,N端的氨基酸残基会从肽链上分离出来,并且其原有的连接顺序不会改变。ATZ中间体被转化为PTH-氨基酸,通过质谱分析鉴定PTH-氨基酸的种类。上述的过程在每次循环中都能够从蛋白质的N端去除一个氨基酸残基,同时新的N端信息经Edman测序也会被看到。此外,质谱技术也在多年间取得巨大进步,基于此,人们也可以对蛋白质和蛋白断裂研究有更加深入的认识。

 

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