一、流式细胞术简介
流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是利用流式细胞仪检测单个微粒（单细胞悬液、生物颗粒等）的多项特性或对特定群体加以分选的一门技术，具有快速、准确、客观的特点，主要包括样品的液流技术、细胞的计数和分选技术，计算机对数据的采集和分析技术等。
二、流式细胞术原理
在一定的压力下，鞘液带着细胞通过喷嘴中心进入到流式照射室，在流式照射室的分析点，激光照射到细胞发生散射和折射，发射出散射光（包括前向散射光和侧向散射光）；同时细胞所携带的荧光素被激光激发并发射出荧光。
前向散射光（Forward scatter, FSC）和侧向散射光（side scatter, SSC）检测器把散射光转变成电信号。而荧光则被聚光器收集，不同颜色的荧光被双色反光镜转向不同的光电倍增检测器，把荧光信号也转变成电信号。这些电信号再经过数据化处理后输入电脑并储存，即可对细胞进行分析或分选。
三、流式细胞术的临床应用
1、流式细胞术在肿瘤学中的应用：流式细胞术可以检测肿瘤细胞增殖周期、检测肿瘤细胞表面标记、癌基因表达产物、进行多药耐药性分析、检测凋亡；
2、流式细胞术在血液学中的应用：检测白血病和淋巴瘤细胞、活化血小板、造血干细胞（CD34+）计数、白血病与淋巴瘤的免疫分型、网织红细胞计数、细胞移植的交叉配型和免疫状态监测；
3、流式细胞术在免疫学中的应用：可以进行淋巴细胞及其亚群分析、淋巴细胞免疫分型、检测细胞因子。
在人全血中，如图所示，由于淋巴细胞、单核细胞和粒细胞的FSC和SSC的参数不同，因此，我们可以用这两个参数将这些细胞区分开。
这对于我们更进一步分析其亚群的比例和功能至关重要。
四、流式的非特异性染色
在进行流式实验时，我们经常会遇到非特异性染色的影响,一般来源有以下几点：
1、抗体的特异性不好，结合了其他抗原
2、抗体结合了特异性的Fc端受体，而不是通过Fab端结合
3、抗体通过蛋白质直接的粘附作用结合在细胞上
4、死细胞细胞膜破损后抗体被聚集在死细胞内部
5、细胞内大分子产生的自发荧光
建议采用以下措施来减少非特异染色：
1、每个抗体使用前都需要做最佳工作浓度的测定
2、使用合适的Fc block去封闭Fc受体，减少抗体和细胞的非特异性结合
3、做死细胞染色，分析时排除死细胞
4、在同样的检测条件下，加入空白细胞对照，可得出细胞自发荧光的水平
5、染色后是否充分洗涤
