一、材料与仪器

小鼠、实验装置、拍摄装置

二、步骤

本次实验用 CRS 软件拍摄，以 Src3+/- 小鼠举例，主要分两阶段：
第二阶段：在另外一侧放另一只陌生的同种小鼠 Stranger 2 ，测试小鼠同样在三箱中自由活动。

具体步骤如下：
1、实验准备
① 实验装置由三个矩形箱子组成，每个箱子内径规格为 40.undefined2undefined22 cm， 每个箱子之间的分隔板为透明的树脂玻璃，中间有通道使三箱相通；
② 在左侧和右侧箱子的中央各放一个规格一致的金属笼子，大小要足够容纳一只小鼠即可；
③ 行为测试最好在 9:00~18:00 之间，照明均匀强度在 650 lux 左右；
④ 利用录像机将整个实验过程录下来，方便后期分析数据；
⑤ 每轮实验之后用 75% 的酒精和卫生纸擦拭实验装置。

2、实验步骤

2.1 第一阶段（social ability）：

三箱两侧，一侧放一只陌生的同种小鼠 Stranger 1，另外一侧只有空的金属笼子，让测试小鼠在三箱中自由活动。

① 实验开始前，将小鼠放在行为测试室适应半个小时；

② 用透明的玻璃树脂板将三个箱子隔开（本次实验不隔），并将测试小鼠放进中间的箱子里适应 5 分钟；

③ 将 Stranger 1 同性小鼠随机放进左侧箱子里的金属笼子里，右侧箱子的金属笼子空着；

④ 去掉隔开箱子的玻璃树脂板，使测试小鼠可以在三个箱子中自由活动 5 分钟；

⑤ 马上开始拍摄并记录下相关参数：

参数1：测试小鼠与 Stranger 1 或空的金属笼之间的直接接触的次数以及持续时间，金属笼周围 3~5 cm 定义为接触范围；

参数2：测试小鼠进入每个箱子的次数以及持续的时间，当小鼠的头和四爪都进入一个箱子就认为它处在那个箱子中。

2.2 第二阶段（social novelty）：

在另外一侧放另一只陌生的同种小鼠 Stranger 2，测试小鼠同样在三箱中自由活动。在第一阶段实验 1 h 后空着的金属笼子中放入第二只陌生同种同性小鼠（Stranger 2），然后记录 5 分钟，观察测试小鼠与 Stranger 1 和 Stranger 2 之间相互接触的时间和次数。

2.3 第三阶段（social memory）：

在第一、二阶段完成 24 h 后，把 Stranger 2 小鼠换成另一只新陌生小鼠 Stranger 3 然后记录 5 分钟，观察测试小鼠与 Stranger 1 和 Stranger 3 的接触次数和时间，若测试小鼠对 Stranger 3 没有社交好奇心，对两边小鼠接触次数和时间差异不显著，则社交记忆能力不强。统计分析方法和第二阶段类似。

3、数据分析

接下来，以野生型小鼠 （wild type, WT） 与基因敲除鼠之间的行为差异来进行数据分析。正常小鼠会表现出社交行为，因此在第一阶段的实验中，正常小鼠与 Stranger 1 交流的时间和次数明显多于空的金属笼。同时，小鼠还具有记忆力和“喜新厌旧”的特性，因此在第二阶段中，小鼠会更喜欢与之前素未谋面的 Stranger 2 交流，而不是已经沟通过十分钟的 Stranger 1 小鼠。

第三阶段由于 Stranger 1 小鼠经过两次的使用已经被全部的测试小鼠所熟悉，和陌生小鼠 Stranger 3 相比，若 WT 小鼠对 Stranger 3 小鼠表现出社交好奇心和偏好性，则 WT 小鼠有良好的社交记忆能力；SRC3 杂合子小鼠对Stranger 3 小鼠没有表现出社交好奇心和偏好性，对两只小鼠的接触次数和时间差不多，则 SRC3 杂合子小鼠社交记忆能力较低。