一、储存要点
1.温度控制:
多数鲎试剂(如PyroSmartNextGen®重组鲎试剂、Pyrotell®-T浊度法鲎试剂等)需储存于2-8℃的环境中,以保持其稳定性和活性。
部分鲎试剂(如Pyrosate®动态凝胶法内毒素快速检测试剂)在储存和运输中不需冷藏,可在室温下稳定保存2年以上,但需避免高温和潮湿环境。
2.避光保存:
某些鲎试剂(如Glucatell®Kit葡聚糖检测试剂)需遮光保存在2-8℃的条件下,以防止光照对其活性产生影响。
3.避免冻融:
多数鲎试剂在复溶后只能冻存一次(如Pyrotell®-T浊度法鲎试剂在-20℃下可保存3个月,但只能冻融一次),多次冻融会导致试剂失效。因此,应谨慎规划使用时间,避免浪费。
4.有效期管理:
鲎试剂的有效期因产品而异,需在有效期内使用。同时,应定期检查试剂的储存条件,确保其始终处于适宜的储存环境中。
二、使用要点
1.操作环境:
实验室应保持清洁、无尘、通风良好,以减少微生物污染的风险。
操作人员应穿戴实验服、手套等防护用品,并遵循无菌操作规范。
2.试剂复溶:
根据试剂说明书的要求,使用适量的复溶缓冲液将冻干鲎试剂复溶。复溶过程中应避免剧烈晃动,以免产生气泡影响检测准确性。
复溶后的试剂应尽快使用,避免长时间放置导致活性降低。
3.加样与反应:
在加样过程中,应确保试剂和样品准确加入反应管中,避免交叉污染。
严格控制反应温度和时间,按照试剂说明书的要求进行操作。反应温度和时间的变化可能会影响检测结果的准确性。
4.结果判读:
根据鲎试剂的类型(如凝胶法、浊度法、显色法等),采用相应的方法判读结果。
凝胶法鲎试剂通过观察凝胶的形成情况来判断内毒素的存在与否;浊度法和显色法则通过测量反应液的浊度或颜色变化来定量检测内毒素含量。
5.质量控制:
定期进行鲎试剂的灵敏度复核和质量控制实验,以确保试剂的准确性和可靠性。
使用已知浓度的内毒素标准品进行阳性对照实验,以验证检测系统的有效性。