在科研实验的领域中,水作为一种不可或缺且至关重要的试剂,其质量的优劣直接关系到实验结果的准确性和可靠性。因此,对于科研人员而言,深入且全面地了解实验室用水的相关知识,无疑是一项必备的素养和技能。
一、水的结构与特性
水,这一由氢和氧两种元素按照特定比例组成的无机物,其化学式为 H₂O。由于氢和氧原子对电子的吸引能力存在差异,导致正、负电荷的中心不一致,从而使水具有极性分子的特性。在水分子之间,存在着一种特殊的相互作用 —— 氢键。当两个水分子同时存在时,它们会通过静电交互作用与氢键相结合,彼此吸引并保持一定的距离。
二、水中杂质
实验室用水中可能存在多种杂质。包括可溶性无机物(如无机盐类、重金属等)、可溶性有机物(如木质素、农药等)、微粒子(如铁锈、悬浮物等)以及微生物(如细菌、藻类等)。这些杂质的存在会影响水的质量和实验的准确性。
三、水质评价标准
1.电阻率
通过测量水中两片电极间的电阻值来确定电阻率,其单位为 MΩ.cm。电阻率的倒数是导电率,用 μs/cm 表示。电阻率是衡量水纯度的常用参数,其值受水温影响。例如,25℃时超纯水电阻率为 18.2MΩ.cm,不同温度下电阻率不同。
2.总有机碳(TOC)
反映水中氧化的有机化合物的含量,单位为 ppm 或 ppb。
3.内毒素
革兰氏阴性细菌的脂多糖细胞壁碎片,单位为 cuf/m
四、水的纯化技术
1.微孔深层过滤
通过物理屏障截留颗粒,根据颗粒大小分级。可截留大量悬浮固体,保护下游设备,但需定期更换。
2.活性炭吸附
用于预处理,去除氯和氯胺。由椰壳或煤制成,孔径范围在 500 - 1000nm 之间。但活性炭易滋生微生物,需定期更换并添加生物杀灭剂抑制微生物生长。
3.反渗透(RO)
可滤除直径小于 1nm 的污染物,对分子量 <100 道尔顿的非离子污染物去除能力较低。理论上可 100% 滤除> 300 道尔顿分子量的分子及颗粒,但不能去除溶解气体。产水速度相对较低,常配以储水箱,后续可配备离子交换或电渗析装置。
4.离子交换法
通过离子交换树脂与 H⁺和 OH⁻的离子交换去除水中离子。树脂分为阳离子树脂和阴离子树脂,使用一段时间后需更换。将 RO 膜设置在离子交换之前可提高水质并延长填料使用寿命。
5.蒸馏
通过改变水的形态分离污染物,理论上可去除除共沸化合物外的所有污染物。但蒸馏水器耗电,且蒸馏水易受空气影响,保存不当易滋生细菌。
6.微滤
对水中颗粒物和微生物进行物理性阻截,根据颗粒大小分级。需定期消毒和更换,新安装的滤器需冲洗。
7.超滤
能去除如蛋白质大小的颗粒,膜孔径在 1 - 50nm 之间。可降低微生物和有机大分子浓度,需定期清洗或更换。国际上通行的超滤膜截留分子量为 5000 道尔顿。
五、实验室常用纯水
1.蒸馏水
最常用的纯水之一,可去除大部分污染物,但无法去除挥发性杂质。新鲜蒸馏水无菌,但储存后易滋生细菌,且储存容器需选择合适材质。单蒸水、双蒸水和三蒸水电阻率不同。
2.去离子水
去掉水中除 H⁺和 OH⁻外的其他离子,仍存在可溶性有机物。不能用作注射用水,存放后易滋生细菌,需现取现用。
3.反渗透水
通过反渗透膜制水,可有效去除多种杂质,脱盐率高。但易受空气二次污染,储存要求较高。
4.超纯水
纯度要求极高,几乎去除所有杂质,电阻率为 18.2MΩ.cm(25℃)。极容易被空气二次污染,建议现取现用。
六、特殊的水
1.无菌水
通过对蒸馏水、超纯水等进行灭菌处理得到,可防止细菌滋生。
2.DEPC 水
在纯水中加入 DEPC 灭活 RNase,再高温灭菌分解 DEPC,不含 DNase 与 RNase。DEPC 有剧毒且昂贵。
3.无 RNase 水
通过各种方法过滤或灭活 RNase 的水,DEPC 水是其中一种。
4.无核酸酶水(非 DEPC 处理)
通过中空纤维超滤柱纯化法制备,不含 DNase、RNase 和其他核酸酶及内毒素的去离子纯水。
科研人员应根据实验需求选择合适的实验室用水,并了解其特性和制备方法,以确保实验的准确性和可靠性。