2025/5/22 14:21:00

酶产品在mRNA疫苗合成及生产流程中扮演着至关重要的角色,具体作用如下:

1.体外转录mRNA:T7 RNA聚合酶是体外转录mRNA的关键酶,能够高效产生大量高质量的mRNA。在无细胞的反应器内,通过T7 RNA聚合酶作用,DNA模板可被转录为mRNA。

2.提高RNA产量:无机焦磷酸酶在体外转录过程中可催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐,为RNA合成反应提供动力,解除无机焦磷酸盐对反应体系的抑制,从而增加RNA产量。

3.防止RNA降解:RNase抑制剂可与RNase A形成1:1复合体,抑制RNase活性,防止RNA在制备过程中降解,确保mRNA的稳定性。

4.mRNA加帽:牛痘病毒加帽酶能够在mRNA的5'端添加Cap0帽子结构,再使用甲基转移酶处理得到Cap1帽子结构,大幅提高mRNA的稳定性和翻译效率。

5.mRNA加尾:Poly(A)聚合酶可催化ATP以AMP的形式依次掺入到RNA的3'末端,形成多聚A尾,增强mRNA的稳定性、提高翻译起始效率,并引导mRNA出核。

6.消除DNA模板:DNA酶用于消除合成后产物中残留的DNA模板,减少下游纯化难度,增加产品纯度。

7.切割双链RNA副产物:修饰改造的RNase III可特异性识别并切割双链RNA(dsRNA),形成18-25 bp的siRNA,避免dsRNA引起的免疫反应,提高蛋白表达效率。

 

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