一、定期移植保藏法
短期保藏法，原理是将菌种在液体或琼脂培养基中进行周期性的移植和培养，保持菌种的活力和纯度。
步骤：
1.选择合适的菌种和培养基，进行预培养和增殖；
2.将菌种接种到液体或琼脂培养基中，4℃～8℃保存；
3.每隔一定的时间（一般为1～4周），将菌种从冰箱中取出，进行移植和培养，然后再放回冰箱保存；
4.在每次移植前后，进行菌种检测和记录，确认菌种活力、纯度、稳定性和遗传特性。
二、液体石蜡保藏法
短期保藏法，原理是将菌种在液体培养基中培养后，加入液体石蜡，形成一层油膜，隔绝空气和水分，保持菌种活力和纯度。
步骤：
1.菌种预培养和增殖；
2.接种到液体培养基，培养至适当的生长阶段；
3.在培养管口部加入液体石蜡，形成油膜，覆盖菌液，封闭培养管；
4.4℃～8℃冰箱保存；
5.使用时，用无菌针头穿过油膜，取出菌液。
三、沙土管保藏法
中期保藏方法，原理是将菌种在液体培养基中培养后，加入含有沙土的玻璃管中，使菌种附着在沙土颗粒上，然后冷冻保存，保持菌种活力和纯度。
步骤：
1.菌种预培养和增殖；
2.接种到液体培养基，培养至适当的生长阶段；
3.在无菌条件下，用火焰灼烧含有沙土的玻璃管，干燥和灭菌；
4.用无菌针头或吸管，菌液滴加到沙土管，使菌液均匀分布，每管约加0.5～1ml的菌液；
5.沙土管放入-20℃～-80℃冷冻箱中保存；
6.使用时，用无菌针头或吸管，从沙土管中取出少量的沙土，加入液体培养基中，进行恢复和培养。
四、低温冷冻保藏法
中期保藏方法，原理是将菌种在液体培养基中培养后，加入适量的冷冻保护剂，如蔗糖、甘油、牛血清等，然后快速冷冻至-20℃～-80℃，保持菌种活力和纯度。
步骤：
1.菌种的预培养和增殖；
2.接种到液体培养基，培养至适当的生长阶段；
3.在无菌条件下，将菌液与冷冻保护剂按一定的比例混合，制成冷冻液，每管约装1～2ml的冷冻液；
4.将冷冻液装入无菌的塑料管或玻璃管中，封闭好管口，贴上标签；
5.将冷冻管放入-20℃～-80℃的冷冻箱中保存；
6.使用时，取出冷冻管，37℃水浴中解冻，然后将冷冻液加入液体培养基中，进行恢复和培养。
六、冷冻干燥保藏法
中期保藏方法，原理是将菌种在液体培养基中培养后，加入适量的冻干保护剂，如蔗糖、牛血清、明胶等，然后在真空条件下进行冷冻干燥，使菌种的水分被亚冰升华，形成干燥的菌粉，保持菌种的活力和纯度。
步骤：
1.菌种预培养和增殖；
2.接种到液体培养基，培养至适当的生长阶段；
3.在无菌条件下，将菌液与冻干保护剂按一定的比例混合，制成冻干液，每管约装1～2ml的冻干液；
4.冻干液装入无菌玻璃管，封闭管口，贴上标签；
5.将冻干管放入干燥机进行冷冻干燥，直到形成干燥的菌粉；
6.取出冻干管，放入密封容器，干燥、避光、常温环境保存；
7.使用时，取出冻干管，溶解菌粉，将冻干液加入液体培养基中培养。
