一、软件启动与模板调用
1.启动软件:打开电脑上的PC端软件,登录后点击模板选项卡。
2.新建或调用模板:
若已有模板,可直接点击加载,自动转入实验选项卡。
若无模板,需点击新建,在项目信息处编辑基本信息和实验程序。
二、基本设置
1.实验名称与类型:根据实验需求命名实验,并选择实验类型(如相对定量、绝对定量等)。
2.检测项目与染料选择:设置检测的基因信息,包括内参基因和目的基因,并选择合适的染料(如FAM、SYBR等)。
三、样本设置
1.样本信息编辑:
输入样本名称,回车确认添加。
如需输入多个有规律的样本信息,可点击批量添加按钮,设置好相应的信息后点击添加。
若某些样本信息本次实验不需要,可选中后点击删除按钮。
2.反应孔位分配:
在反应版设置界面中,将之前设置的基因和样本信息分配到不同的样品孔中。
选中待设置的孔位,分配基因属性(如待测样本、阴性对照等)。
四、程序设置
1.反应体积与热盖温度:设置反应的体积和热盖温度(通常热盖温度默认为105摄氏度,无需修改)。
2.反应程序编辑:
根据试剂说明书设置反应程序,包括变性、退火、延伸等步骤的温度和时间。
可点击需要设置的温度或时间进行修改,或点击程序上方的新建运行段来添加或删除步骤。
如需增加溶解曲线,可点击新建运行段右侧的小三角,选择溶解段。
五、保存与运行
1.保存文件:单击保存按钮,保存实验文件。
2.运行实验:单击运行按钮,开始运行实验。在弹出的对话框中设置数据保存位置及数据名称,然后点击保存即可开始程序。
六、注意事项
1.模板保存:设置好的模板可保存以备后续使用,避免重复设置。
2.样本与程序对应:确保样本信息与反应孔位正确对应,避免实验错误。
3.程序验证:在正式实验前,建议先进行预实验验证程序设置是否正确。