一、分离血清样本的方法
1.自然凝固法:将采集的血液标本置于室温下,血液中的纤维蛋白原会逐渐转变为纤维蛋白,形成血凝块,血凝块收缩后血清析出。一般需等待1 - 2小时,具体时间因温度等因素有所差异。该方法操作简单,但耗时较长。
2.离心分离法:把采集好的血液标本放入离心机中,通常转速在3000 - 4000转/分钟,离心5 - 10分钟。在离心力作用下,血液中的红细胞、白细胞等有形成分下沉到管底,血清分层在上方。该方法分离速度快,效果好。
3.促凝剂法:在采集血液的容器中预先添加促凝剂,能加速血液凝固过程。一般在添加促凝剂后,血液在数分钟内即可凝固,随后通过离心等方式获取血清。
4.化学沉淀法:利用某些化学物质与血液中的特定成分发生反应,使其沉淀下来,从而实现血清与其他成分的分离。例如加入特定的盐溶液或有机试剂,使蛋白质等成分沉淀,经过过滤或离心等操作,得到上层的血清。不过该方法可能会对血清成分产生一定影响。
5.层析法:通过将血液样品注入层析柱,利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异,使血清中的各种成分在层析柱中得以分离。该方法能较为精细地分离血清中的不同成分,但操作复杂,对设备和技术要求较高。
二、离心机操作步骤
1.准备工作:
将离心机放置在平稳的台面上,并将电源插头插入电源插座。
检查离心机的螺旋盖、离心管和转子是否干净,并确保无损坏。
根据实验要求选择合适的离心管和转子,并将其安装在离心机上。
确保离心管密封良好,将待离心的样品稳定注入离心管中,注意不超过离心管容量的75%。
使用标签或标记笔在离心管上标注样品的信息。
2.安装与平衡:
将平衡好的离心管对称放入转孔内,离心管平衡误差应在0.1g以内。
轻轻关闭离心机的螺旋盖,确保盖合紧密,以避免在离心过程中泄漏和样品飞溅。
3.参数设置与启动:
打开离心机的面板,按照实验要求设置离心机的参数,如转速、离心时间等。
确认设置参数无误后,关闭离心机的面板。
按下离心机的启动按钮,离心机开始启动。
4.离心过程:
等待离心机加速至设定转速,并保持稳定。
按照设置的离心时间进行离心,等待离心时间结束。
5.结束与清理:
离心时间结束后,按下离心机的停止按钮,离心机停止运转。
等待离心机完全停下后再打开离心机螺旋盖。
小心地取出离心管,注意避免离心管底部残留的液体或沉淀溅出。
将离心机螺旋盖、离心管和转子取出,用温和的清洁剂和温水彻底清洗。
用干净的纸巾或布擦干离心机螺旋盖、离心管和转子,并放置在通风干燥的地方晾干。
定期检查离心机的零部件是否完好,并按照使用手册的要求对离心机进行维护和保养。
三、分离血清样本的方法
自然凝固法:将采集的血液标本置于室温下,血液中的纤维蛋白原会逐渐转变为纤维蛋白,形成血凝块,血凝块收缩后血清析出。一般需等待1 - 2小时,具体时间因温度等因素有所差异。该方法操作简单,但耗时较长。
离心分离法:把采集好的血液标本放入离心机中,通常转速在3000 - 4000转/分钟,离心5 - 10分钟。在离心力作用下,血液中的红细胞、白细胞等有形成分下沉到管底,血清分层在上方。该方法分离速度快,效果好。
促凝剂法:在采集血液的容器中预先添加促凝剂,能加速血液凝固过程。一般在添加促凝剂后,血液在数分钟内即可凝固,随后通过离心等方式获取血清。
化学沉淀法:利用某些化学物质与血液中的特定成分发生反应,使其沉淀下来,从而实现血清与其他成分的分离。例如加入特定的盐溶液或有机试剂,使蛋白质等成分沉淀,经过过滤或离心等操作,得到上层的血清。不过该方法可能会对血清成分产生一定影响。
层析法:通过将血液样品注入层析柱,利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异,使血清中的各种成分在层析柱中得以分离。该方法能较为精细地分离血清中的不同成分,但操作复杂,对设备和技术要求较高。
四、离心机操作步骤
1.准备工作:
将离心机放置在平稳的台面上,并将电源插头插入电源插座。
检查离心机的螺旋盖、离心管和转子是否干净,并确保无损坏。
根据实验要求选择合适的离心管和转子,并将其安装在离心机上。
确保离心管密封良好,将待离心的样品稳定注入离心管中,注意不超过离心管容量的75%。
使用标签或标记笔在离心管上标注样品的信息。
2.安装与平衡:
将平衡好的离心管对称放入转孔内,离心管平衡误差应在0.1g以内。
轻轻关闭离心机的螺旋盖,确保盖合紧密,以避免在离心过程中泄漏和样品飞溅。
3.参数设置与启动:
打开离心机的面板,按照实验要求设置离心机的参数,如转速、离心时间等。
确认设置参数无误后,关闭离心机的面板。
按下离心机的启动按钮,离心机开始启动。
4.离心过程:
等待离心机加速至设定转速,并保持稳定。
按照设置的离心时间进行离心,等待离心时间结束。
5.结束与清理:
离心时间结束后,按下离心机的停止按钮,离心机停止运转。
等待离心机完全停下后再打开离心机螺旋盖。
小心地取出离心管,注意避免离心管底部残留的液体或沉淀溅出。
将离心机螺旋盖、离心管和转子取出,用温和的清洁剂和温水彻底清洗。
用干净的纸巾或布擦干离心机螺旋盖、离心管和转子,并放置在通风干燥的地方晾干。
定期检查离心机的零部件是否完好,并按照使用手册的要求对离心机进行维护和保养。