2025/4/7 10:21:00

一、硝酸纤维素膜(NC膜)的选择

1.膜的核心特性

特性

描述

孔径(水层析时间)

以“秒/4cm”为单位,135s(快速膜)、180s(慢速膜)。孔径越小,灵敏度越高,但跑板速度减慢。

蛋白结合能力

单克隆抗体结合优于多克隆抗体;大分子蛋白结合难度增加。

供应商差异

不同品牌膜因生产工艺和配方不同,性能存在差异(如S&S、MILLIPORE、国产膜)。

2.常用品牌与型号

MILLIPORE:M135(有/无背衬)、M180(有/无背衬)。

Immunopore RP(100 sec/4cm)、PuraBind R(140 sec/4cm)。WHATMAN & S&S:

SARTORIUS:CN140。

国产膜:如伊能膜,性能接近进口膜,成本较低。

 

二、硝酸纤维素膜的应用技巧

1.膜的处理与优化

预处理:膜通常已添加表面活性剂,可直接使用。

封闭:使用封闭液(如含蛋白或表面活性剂的缓冲液)减少非特异性结合。

2.点样与反应条件

点样环境:湿度控制在45-65%,避免静电干扰。

点样仪器:非接触式点膜机优于划膜式,减少物理损伤。

缓冲液配方:常用0.01M PBS(pH 7-7.2),添加NaCl、表面活性剂(如Tween-20)等优化性能。

3.灵敏度与特异性平衡

膜孔径选择:快速膜(135s)适用于双抗体夹心法,慢速膜(180s)适用于竞争法。

点样位置:T线上移增加反应时间,提高灵敏度。

4.储存与稳定性

储存条件:避光、密封,防止过干或过湿。

稳定性测试:对封闭后的膜进行稳定性测试,确保长期性能。

 

三、注意事项

1.避免非特异性结合:通过优化封闭液和缓冲液配方减少假阳性。

2.控制反应时间:反应时间过长可能导致非特异性结合,需根据试验结果调整。

3.膜宽度与用途:18mm/20mm用于试纸条,25mm用于测试板。

 

四、总结与选择建议

1.高灵敏度需求:选择慢速膜(180s),优化点样位置和缓冲液配方。

2.快速检测需求:选择快速膜(135s),平衡灵敏度和反应速度。

3.成本控制:优先考虑国产膜(如伊能膜),经优化后可用于多数场景。

 

通过以上选择和应用技巧,可显著提升胶体金试纸的性能和稳定性。建议根据实验需求(如反应体系、灵敏度要求)进行小批量测试,确定最佳膜型和工艺参数。

 

上一篇:粗谈过滤,表面过滤与深层过滤的差异和探究 下一篇:六种常用滤膜的特性及用途