一、ScanLater免疫印迹蛋白质梯简介

ScanLater免疫印迹蛋白质梯是ScanLater免疫印迹蛋白质检测系统的重要组成部分。该系统由Molecular Devices公司开发，旨在简化并优化蛋白质免疫印迹（Western Blot）实验流程，提高实验效率和准确性。

ScanLater免疫印迹蛋白质梯由7个生物素标记的重组蛋白以及3个预染的蛋白质marker组成。这些生物素标记的重组蛋白的分子量分别为10KD、20KD、40KD、50KD、80KD、100KD和140KD，为实验提供了精确的分子量标准。预染的蛋白质marker则用于监测蛋白质电泳、杂交定位和转膜效率。

二、ScanLater免疫印迹蛋白质梯的工作原理

在实验中，首先将样品进行SDS-PAGE电泳分离，然后将蛋白质转移到硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯膜上。接下来，将膜与铕标记的链霉亲和素一起孵育，由于ScanLater免疫印迹蛋白质梯中的重组蛋白已被生物素标记，因此它们能够与铕标记的链霉亲和素特异性结合。

孵育完成后，使用安装在SpectraMax i3或SpectraMax Paradigm多功能酶标仪上的ScanLater免疫印迹蛋白质检测卡盒对膜进行读取。该卡盒利用时间分辨荧光技术（TRF）检测铕元素，从而实现对生物素标记蛋白的检测。

三、ScanLater免疫印迹蛋白质梯在蛋白质分子量估计中的应用

1.提供精确的分子量标准：

ScanLater免疫印迹蛋白质梯中的生物素标记重组蛋白为实验提供了精确的分子量标准。通过与这些标准蛋白进行比较，可以准确地估计待测蛋白质的分子量。

2.简化实验流程：

使用ScanLater免疫印迹蛋白质梯无需进行额外的加热或其他准备步骤，简化了实验流程。同时，该系统采用时间分辨荧光技术，显著降低了自发荧光和其他半衰期较短的发射光的背景噪音，提高了实验结果的准确性。

3.提高实验效率：

ScanLater免疫印迹蛋白质检测系统能够快速、准确地读取实验结果，大大提高了实验效率。此外，由于该系统无需使用底物，节省了实验时间和成本。

4.适用于多种应用场景：

ScanLater免疫印迹蛋白质梯适用于多种应用场景，包括生物制药、临床研究、分子生物学等领域。通过估计蛋白质的分子量，可以为进一步的研究提供重要的参考信息。

四、实验示例

以检测白介素-17（IL-17）为例，将IL-17样品与ScanLater免疫印迹蛋白质梯一起进行SDS-PAGE电泳分离，并将蛋白质转移到荧光膜上。经过一抗孵育、封闭、洗膜等步骤后，孵育铕标记的抗大鼠IgG和铕标记的抗链霉亲和素抗体。最后，使用ScanLater免疫印迹蛋白质检测系统进行读取。通过比较IL-17条带与ScanLater免疫印迹蛋白质梯中标准蛋白条带的位置，可以准确地估计IL-17的分子量。

五、总结

应用ScanLater免疫印迹蛋白质梯估计蛋白质的分子量是一种高效、准确的方法。该系统提供了精确的分子量标准，简化了实验流程，提高了实验效率，并适用于多种应用场景。通过ScanLater免疫印迹蛋白质梯的应用，可以为进一步的研究提供重要的参考信息。