一、主要用途
1.酵母菌株鉴定:Biolog YT板能够利用固定在微孔板上的94个不同的生化试验,对广泛的酵母菌提供表型概况并进行鉴定。
2.酵母菌代谢实验:除了鉴定外,YT板还可用于酵母菌的代谢实验,研究酵母菌对不同碳源的利用情况。
二、使用流程
1.准备阶段:
培养基准备:使用专用的BUY(Biolog Universal Yeast)培养基对需要鉴定的酵母菌进行活化培养。
菌悬液制备:将活化培养后的酵母菌用无菌水制成指定细胞浓度的菌悬液。
2.接种阶段:
接种操作:将菌悬液按每孔100μl的量加到YT板上。
孵育条件:将接种后的YT板置于26℃培养箱中孵育。
3.培养与观察阶段:
培养时间:孵育24、48或72小时后,观察YT板上的颜色变化。
颜色变化:能被酵母菌利用的碳源孔中的呼吸作用会增强,导致四唑氧化还原染料被还原变成紫色,同时微生物生长导致浊度变高。
4.结果分析阶段:
指纹图谱比对:通过YT板上显紫色及浊度变化所产生的指纹图谱与Biolog数据库中的数据进行比对。
结果鉴定:如果找到匹配的指纹图谱,即可鉴定出所分离的酵母菌种类。
三、注意事项
1.纯培养要求:纯培养是一切鉴定的前提,确保接种的酵母菌为纯种。
2.培养基选择:使用专用的BUY培养基进行活化培养,以确保待测菌株的代谢特征图谱与数据库中的图谱精确匹配。
3.菌悬液浓度:准确调整菌悬液的菌体浓度到指定范围(如47%T,上下偏差2%),以确保结果的准确性。
4.无菌操作:在整个操作过程中,严格遵守无菌操作规程,避免污染影响结果。
5.孵育条件:注意保持培养环境的湿度和温度,以减少微孔板中菌液的蒸发和温度波动对结果的影响。
6.结果比对:在比对指纹图谱时,应综合考虑多个时间点的结果,以提高鉴定的准确性。
通过以上介绍,可以了解Biolog YT板的主要用途、使用流程及注意事项。在实际操作中,应严格按照流程进行操作,并注意相关事项,以确保鉴定结果的准确性和可靠性。