合成细胞培养基是细胞培养中的重要组成部分,它提供了细胞生长、增殖和分化所需的营养物质和环境条件。以下是合成细胞培养基主要成分的详细介绍:
一、水
1.重要性:水是细胞的主要成分,也是细胞赖以生存的主要环境。细胞培养液中90%以上的成分是水。
2.品质要求:细胞对水的品质非常敏感,水的品质将直接影响细胞培养的效果。细胞培养用水须经过纯化,品质应符合中国药典注射用水标准或者超纯水的标准。
二、氨基酸
1.重要性:氨基酸是合成培养基的主要成分,其中必需氨基酸对细胞生长至关重要。
2.功能:
蛋白质的基本组成单位,用于合成蛋白质和多肽。
可用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物,如核酸、尼克酰胺等。
某些氨基酸还具有独特的生理作用,如甘氨酸参与生物转化作用,丙氨酸和谷氨酰胺参与细胞内氨的运输等。
可转变成糖类和脂肪,参与氧化供能。
3.特殊氨基酸:谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞会生长不良甚至死亡。由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培养液内。
三、维生素
1.重要性:维生素是维持细胞生长的生物活性物质,在细胞代谢中起调节及控制作用。
2.功能:许多维生素参与构成各种酶的活性基团的成分,没有它们,酶便没有活性,代谢活动将无法进行。例如,泛酸可以在细胞内转变成酰基载体蛋白和辅酶(如辅酶A),参与糖类、脂类和蛋白质代谢中的催化反应;维生素B12则在细胞内参与叶酸的合成和脂肪酸的合成等。
四、碳水化合物
1.主要成分:培养基中的碳水化合物包括葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠等。
2.功能:主要提供细胞生长的能量,也可参与合成蛋白质和核酸。其中,葡萄糖是细胞的主要碳源和能量来源,含量一般为5~25mmol/L。
五、无机盐
1.主要成分:培养基含有平衡盐溶液的钾、钠等无机盐,有些培养基含有微量元素,如Fe²⁺、Zn²⁺、Ca²⁺等。
2.功能:
维持细胞培养液渗透压平衡。
参与细胞的代谢活动。
通过提供钠、钾和钙离子,帮助细胞调节细胞膜功能。
六、其他辅助成分
1.代谢中间产物:如三磷酸腺苷、辅酶A等,参与细胞代谢过程。
2.氧化还原剂:如2-巯基乙醇,对细胞生长有很重要的作用,可以刺激细胞增殖,避免过氧化物对培养细胞的损害。
3.pH指示剂:如酚红,用于指示培养基的pH值。但酚红具有一定的固醇类激素样的作用,如雌激素样作用,尤其对于所培养的哺乳类动物细胞,可能发生的固醇类反应不可忽视。
4.血清及血清替代成分:血清是细胞培养中的重要补充成分,提供细胞生长所需的生长因子和其他营养物质。但近年来,为了减少对动物来源产品的依赖,人们开始使用血清替代成分,如蛋白质、多肽、核苷等。
综上所述,合成细胞培养基的主要成分包括水、氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐以及其他辅助成分。这些成分共同为细胞提供了一个适宜的生长环境,满足其生长、增殖和分化的需求。