Glass gel磷酸化蛋白预制胶是一种专门用于磷酸化蛋白电泳的预制胶,其特点和优势如下:
一、成分与原理
1.核心成分:Glass gel磷酸化蛋白预制胶中预先加入了100μmol/L的Phos-iso Acrylamide,这是一种能与磷酸基团特异性结合的双核金属络合物,能够对磷酸化蛋白进行分离和检测。同时,预制胶中含有锌作为金属离子,在中心凝胶缓冲液中保存稳定性很好。
2.原理:在电泳过程中,固定在凝胶上的Phos-iso复合物可以特异性结合磷酸化蛋白,使得磷酸化蛋白的电泳迁移率降低,从而实现磷酸化和非磷酸化蛋白的分离。
二、特点与优势
1.无需抗体:使用Glass gel磷酸化蛋白预制胶时,不需要准备针对磷酸化蛋白的抗体,用总抗体而非抗磷酸化蛋白的抗体即可同时检测磷酸化和非磷酸化的蛋白。
2.兼容性强:该预制胶兼容市场上主流的mini电泳槽,如Bio-Rad、Invitrogen、天能和君意东方等,方便实验人员的使用。
3.高灵敏度与分辨率:由于Phos-iso Acrylamide的特异性结合作用,Glass gel磷酸化蛋白预制胶能够高灵敏度和高分辨率地分离和检测磷酸化蛋白。
4.操作简便:预制胶的使用非常简便,打开包装即可直接使用,无需进行繁琐的配制和灌胶过程。
5.稳定性好:采用自动化的灌胶生产技术,确保了产品质量的高稳定性和重复性。同时,采用玻璃胶板,有效减少蛋白非特异性吸附,使蛋白条带更为敏锐、清晰。
三、应用范围
Glass gel磷酸化蛋白预制胶广泛应用于蛋白质磷酸化的研究中,包括细胞信号传导、基因表达调控、细胞周期调控等生物学过程的探究。同时,它也可以用于疾病机制的研究、药物靶点的发现以及药物筛选等领域。
四、使用注意事项
1.在使用Glass gel磷酸化蛋白预制胶时,应确保电泳槽、电极和缓冲液等设备的清洁和无菌,以避免对实验结果产生干扰。
2.在进行电泳实验时,应严格控制电泳条件,如电压、电流和时间等,以确保实验结果的准确性和可靠性。
3.在分析实验结果时,应结合其他实验方法和技术进行综合分析,以得出更加准确的结论。
综上所述,Glass gel磷酸化蛋白预制胶具有无需抗体、兼容性强、高灵敏度与分辨率、操作简便以及稳定性好等特点和优势,在蛋白质磷酸化的研究中具有广泛的应用前景。