2024/12/20 10:02:00

总的来说,咱们动物体内的免疫细胞基本分为了淋巴亚群和髓系亚群。

淋巴亚群主要由T,B,NK三类细胞组成,辅以少量的固有免疫细胞;而髓系细胞主要由单核,粒细胞,巨噬细胞等组成,特殊条件下还会存在MDSC等细胞。另外就是树突细胞,他本身存在pDC和cDC两种形态,算是一个特例。

在人的样本中,我们通常会测定外周血pbmc中的免疫细胞,这时候常用的特异性标记物如下:

首先值得一提的就是单核细胞,很多老文里提出CD14+就是单核细胞,但是实际上单核细胞分为classical (CD14++CD16−), intermediate (CD14++ CD16+),和non-classical(CD14+CD16++)monocytes:

其次比较容易弄错的就是很多会单纯的认为CD11c就是DC细胞了,而实际上CD11c+只能算是DC的一部分(髓系DC),如果我们要完整的得到所有DC细胞,应该考虑对其进行如下分群:

另外还有一类比较特殊的细胞是MDSC细胞,这类细胞在正常人体内是非常少的,文献报道他的表型都是基于CD11b+的免疫抑制性的细胞,所以常见标记物多数文献选择了CD11b+CD33+HLA-DR-:

最后就是开头提到的巨噬细胞了,目前大部分人类的巨噬细胞是采用的CD11b+CD68+进行标记的,但是值得注意的是CD68是一类跨膜蛋白,在单纯的表面染色中他的染色效率往往不是那么让人满意,如果需要得到更明显的阳性信号,建议对样本进行固定破膜后再染色的:

其实,对于人的Th细胞亚群的标记物选择,是经历了一个由复杂,到简单的过程的,传统的人th细胞亚群的标记物,是遵循着这些细胞亚群分泌因子来进行鉴定的,例如我们认为能分泌IFN-g的CD4细胞就是Th1细胞,而能分泌IL-4的就是Th2细胞,但是由于IFN-g和IL-4这些分泌因子本身难以分泌,并且染色也比较困难,所现在多数临床科研流式都选择了一些趋化因子受体来进行人Th细胞以及Treg细胞的鉴定,具体指标如下:

伴随着时间的发展,越来越多的文献中也选择这种方式来鉴定人的T细胞亚群:

 

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